[发明专利]在酵母中产生脂肪醇及其衍生物的方法

权利要求书

1.一种能够产生去饱和脂肪醇的产油酵母细胞，所述细胞：

i)表达至少一种能够在脂肪酰基-CoA中引入至少一个双键的异源去饱和酶；并且

ii)表达至少一种能够将至少一部分的所述去饱和脂肪酰基-CoA转化为去饱和脂肪醇的异源脂肪酰基-CoA还原酶；并且

iii)具有导致Pex10(SEQ ID NO:8)的活性降低的突变和导致Hfd1(SEQ ID NO:4)、Hfd4(SEQ ID NO:6)、Fao1(SEQ ID NO:22)和GPAT(SEQ ID NO:10)中的至少一种的活性降低的突变，或者具有导致与Pex10(SEQ ID NO:8)具有至少60％同源性的至少一种蛋白质的活性降低的突变和导致Hfd1(SEQ ID NO:4)、Hfd4(SEQ ID NO:6)、Fao1(SEQ ID NO:22)和GPAT(SEQ ID NO:10)中的至少一种的活性降低的突变，所述至少一种蛋白质与Pex10(SEQID NO:8)以及Hfd1(SEQ ID NO:4)、Hfd4(SEQ ID NO:6)、Fao1(SEQ ID NO:22)和GPAT(SEQID NO:10)中的至少一种具有如至少65％同源性、如至少70％同源性、如至少75％同源性、如至少80％同源性、如至少81％同源性、如至少82％同源性、如至少83％同源性、如至少84％同源性、如至少85％同源性、如至少86％同源性、如至少87％同源性、如至少88％同源性、如至少89％同源性、如至少90％同源性、如至少91％同源性、如至少92％同源性、如至少93％同源性、如至少94％同源性、如至少95％同源性、如至少96％同源性、如至少97％同源性、如至少98％同源性、如至少99％同源性。

2.根据权利要求1的酵母细胞，其中所述酵母属于耶氏酵母属(Yarrowia)物种，优选地所述酵母是解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。

3.根据前述权利要求中任一项的酵母细胞，其中所述至少一种异源去饱和酶选自Δ3去饱和酶、Δ5去饱和酶、Δ6去饱和酶、Δ7去饱和酶、Δ8去饱和酶、Δ9去饱和酶、Δ10去饱和酶、Δ11去饱和酶、Δ12去饱和酶、Δ13去饱和酶和Δ14去饱和酶。

4.根据前述权利要求中任一项的酵母细胞，其中Hfd1、Hfd4、Pex10和Fao1或与其具有至少60％同源性的蛋白质的活性的降低是部分的或完全的，和/或其中GPAT或与其具有至少60％同源性的蛋白质的活性的降低是部分的。

5.根据前述权利要求中任一项的酵母细胞，其中所述去饱和酶衍生自昆虫的生物，如来自鳞翅目(Lepidoptera)，优选地所述去饱和酶是与如SEQ ID NO:2中所示的来自脐橙螟(Amyelois transitella)的Δ11去饱和酶具有至少60％同源性的Δ11去饱和酶或与如SEQID NO:18中所示的来自黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的Δ9去饱和酶具有至少60％同源性的Δ9去饱和酶。

6.根据前述权利要求中任一项的酵母细胞，其中所述FAR选自：

i)与如SEQ ID NO:14中所示的来自棉铃虫(Helicoverpa armigera)的FAR具有至少80％同源性的FAR；

ii)与如SEQ ID NO:16中所示的来自烟夜蛾(Helicoverpa assulta)的FAR具有至少80％同源性的FAR；

iii)与如SEQ ID NO:12中所示的来自Heliothis subflexa的FAR具有至少80％同源性的FAR；以及

iv)与如SEQ ID NO:24中所示的来自Bicyclus anynana的FAR具有至少80％同源性的FAR，

优选地,所述FAR与来自棉铃虫的FAR或与来自Heliothis subflexa的FAR具有至少80％同源性。

7.根据前述权利要求中任一项的酵母细胞，其还表达能够将至少一部分的所述去饱和脂肪醇转化为去饱和脂肪酰基乙酸酯的乙酰基转移酶。