[发明专利]增强的hAT家族转座子介导的基因转移及相关组合物、系统和方法

权利要求书

1.一种突变TcBuster转座酶，其包含与全长SEQ ID NO：1至少70％相同的氨基酸序列，并且与SEQ ID NO：1相比具有增加在中性pH下的净电荷的一个或多个氨基酸置换，其中与具有氨基酸序列SEQ ID NO：1的野生型TcBuster转座酶相比，所述突变TcBuster转座酶具有增加的转座效率。

2.根据权利要求1所述的突变TcBuster转座酶，其中所述一个或多个氨基酸置换包括向赖氨酸或精氨酸的置换。

3.根据权利要求1或2所述的突变TcBuster转座酶，其中所述一个或多个氨基酸置换包括天冬氨酸或谷氨酸向中性氨基酸、赖氨酸或精氨酸的置换。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的突变TcBuster转座酶，其包含来自表4的一个或多个氨基酸置换。

5.一种突变TcBuster转座酶，其包含与全长SEQ ID NO：1至少70％相同的氨基酸序列，并且在DNA结合和寡聚化域、插入域、Zn-BED域或其组合中具有一个或多个氨基酸置换，其中与具有氨基酸序列SEQ ID NO：1的野生型TcBuster转座酶相比，所述突变TcBuster转座酶具有增加的转座效率。

6.一种突变TcBuster转座酶，其包含与全长SEQ ID NO：1至少70％相同的氨基酸序列，并且具有来自表1的一个或多个氨基酸置换。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的突变TcBuster转座酶，其与SEQ ID NO：1相比包含增加在催化域内或邻近处在中性pH下的净电荷的一个或多个氨基酸置换。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的突变TcBuster转座酶，其与SEQ ID NO：1相比包含增加在中性pH下的净电荷的一个或多个氨基酸置换，其中当根据SEQ ID NO：1编号时，所述一个或多个氨基酸位于邻近D223、D289或E589处。

9.根据权利要求7或8所述的突变TcBuster转座酶，其中所述邻近是约80、75、70、60、50、40、30、20、10或5个氨基酸的距离。

10.根据权利要求7或8所述的突变TcBuster转座酶，其中所述邻近是约70至80个氨基酸的距离。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的突变TcBuster转座酶，其中所述突变TcBuster转座酶的氨基酸序列与全长SEQ ID NO：1至少80％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％相同。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的突变TcBuster转座酶，其包含来自表2的一个或多个氨基酸置换。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的突变TcBuster转座酶，其包含来自表3的一个或多个氨基酸置换。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的突变TcBuster转座酶，当根据SEQ ID NO：1编号时，其包含氨基酸置换V377T、E469K和D189A。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的突变TcBuster转座酶，当根据SEQ ID NO：1编号时，其包含氨基酸置换K573E和E578L。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的突变TcBuster转座酶，当根据SEQ ID NO：1编号时，其包含氨基酸置换1452K。