[发明专利]遗传修饰的自然杀伤细胞

权利要求书

1.一种自然杀伤细胞群体，其中所述自然杀伤(NK)细胞经遗传修饰以使其缺乏NK抑制性分子的表达或呈现出降低的NK抑制性分子的表达。

2.权利要求1的群体，其中所述NK抑制性分子是选自CBLB、NKG2A和TGFBR2的一种或多种NK抑制性分子。

3.权利要求1或2的群体，其中所述遗传修饰的NK细胞与其中所述NK抑制性分子的表达未被敲除或降低的NK细胞相比具有更高的对抗肿瘤细胞的细胞毒性。

4.权利要求3的群体，其中所述肿瘤细胞选自多发性骨髓瘤细胞、急性髓性白血病(AML)细胞、乳腺癌细胞、头颈癌细胞、肉瘤细胞、导管癌细胞、白血病细胞、急性T细胞白血病细胞、慢性髓性淋巴瘤细胞、慢性髓细胞性白血病(CML)细胞、多发性骨髓瘤(MM)、肺癌细胞、结肠腺癌细胞、组织细胞性淋巴瘤细胞、结肠直肠癌细胞、结直肠腺癌细胞和视网膜母细胞瘤细胞。

5.权利要求4的群体，其中所述肿瘤细胞是实体肿瘤细胞。

6.权利要求5的群体，其中所述实体肿瘤细胞选自肝肿瘤细胞、肺肿瘤细胞、胰腺肿瘤细胞、肾肿瘤细胞和多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞。

7.权利要求1的群体，其中所述NK抑制性分子的表达被敲除。

8.权利要求7的群体，其中所述NK抑制性分子的表达通过CRISPR/CAS9系统、锌指核酸酶或TALEN核酸酶敲除。

9.权利要求7的群体，其中所述NK抑制性分子的表达通过CRISPR相关技术敲除。

10.权利要求1或2的群体，其中所述NK抑制性分子是CBLB。

11.权利要求7-10任一项的群体，其中CBLB表达的敲除产生在用ICAM-1和MICA刺激时比其中CBLB未被敲除的NK细胞具有更高的IFNγ分泌的NK细胞群体。

12.权利要求7-10任一项的群体，其中CBLB表达的敲除产生在用ICAM-1和MICA刺激时与其中CBLB未被敲除的NK细胞相比具有更高的脱粒的NK细胞群体。

13.权利要求12的群体，其中所述脱粒通过CD107a的增加来测量。

14.权利要求7-10任一项的群体，其中CBLB表达的敲除产生与其中CBLB未被敲除的NK细胞相比具有GM-CSF、可溶性CD137(sCD137)、IFNγ、MIP1α、MIP1β、TNFα和穿孔素中一种或多种的分泌的变化的NK细胞。

15.权利要求1或2的群体，其中所述NK抑制性分子是NKG2A。

16.权利要求15-19任一项的群体，其中NKG2A表达的敲除产生在NKG2A激动剂抗体存在下用ICAM-1和MICA刺激时与其中NKG2A未被敲除的NK细胞相比具有更高的脱粒的NK细胞群体。

17.权利要求16的群体，其中所述脱粒通过CD107a的增加来测量。

18.权利要求16或17的群体，其中NKG2A表达的敲除产生与其中NKG2A未被敲除的NK细胞相比具有GM-CSF、可溶性CD137(sCD137)、IFNγ、MIP1α、MIP1β、TNFα和/或穿孔素中一种或多种的分泌的变化的NK细胞群体。

19.权利要求1或2的群体，其中所述NK抑制性分子是TGBFR2。