[发明专利]用于量化活生物体的方法和器件以及器件的使用

说明书

公开了一种用于量化液体样品(2)中的活生物体(1、4)的方法，所述方法包括以下步骤：·将液体样品(2)引导到腔室(3)中，·分析腔室(3)内的样品(2)的图片以检测在样品中自身移动的生物体(4)的数量，·用处于紫‑蓝色光谱的至少一部分中的光照射样品(2)，同时检测在腔室(3)内的样品中发荧光的生物体(1)的数量，以及·分析腔室(3)内的样品(2)的图片，同时用处于紫‑蓝色光谱的至少一部分中的光照射样品(2)以检测自身移动且发荧光的生物体(1、4)的数量。还公开了用于量化活生物体(1、4)的器件(15)以及器件(15)的使用。

技术领域

本发明涉及一种用于量化液体样品中的活生物体的方法，所述方法包括将液体样品引导到腔室内并且分析腔室内的样品的图片的步骤。本发明还涉及一种用于量化液体样品中的活生物体的器件以及器件的使用。

背景技术

通常需要检测和量化例如与研究、环境监控等相关的液体样品中的活生物体的数量。例如，与船舶中的压载水相关的，海洋环境保护委员会提出的批准压载水管理系统的指南规定，处理后的压载水每毫升包含10-50μm粒级的至多10个细胞，以及每立方米包含50μm粒级的至多10个细胞。因此，在这种情况下，需要分析排放压载水。

用于量化液体样品中活生物体数量的一种明显方法是将样品置于显微镜下，并然后手动检测细胞是否存活、手动检测其尺寸以及手动量化相关细胞。然而，这样的过程既耗时又昂贵。

因此，从US 5,093,866A已知，通过在图片检测设备上对通过介质传播的光进行成像以及通过在细胞中诱导荧光并在图片检测设备上对所述光进行成像，产生有关流体介质中的细胞、细菌和颗粒的运动性和其他特征的信息。然而，该方法昂贵且不准确。

因此，本发明的目的在于提供一种经济有效的用于量化液体样品中的活生物体的技术。

发明内容

本发明提供一种用于量化液体样品中的活生物体的方法，所述方法包括以下步骤：

将液体样品引导到腔室中，

分析腔室内的样品的图片，以检测在样品中自身移动的生物体的数量，

用处于紫-蓝色光谱的至少一部分中的光照射样品，同时检测在腔室内的样品中发荧光的生物体的数量，以及

分析腔室内的样品的图片，同时用处于紫-蓝色光谱的至少一部分中的光照射样品，以检测自身移动且发荧光的生物体的数量。

例如，任何给定的压载水的水样品将容纳死亡或存活的许多不同的异养和自养生物体，它们能够自身移动或不能自身移动并且在暴露于处于紫-蓝色光谱中的光时能够发荧光或不能发荧光。

在用处于紫-蓝色光谱中的光照射生物体后，可通过生物体的荧光来检测生物体内的叶绿素，并且叶绿素的存在是活的自养细胞的指示，因为叶绿素在细胞受损后会很快消失。同样，应当认识到，能够自身移动的生物体也是活的。

因此，有利的是通过检测能动生物体的专门过程和检测发荧光生物体的另一个专门过程来量化液体样品中的活生物体。然而，某些生物体既是能动的又是发荧光的，并且因此有利的是通过另外检测这些生物体来提高方法的准确性，从而可以实现更好且更有效地量化活生物体。

应当指出，即使以给定顺序列出了方法步骤，权利要求的范围也不限于以该顺序执行的不同方法步骤。例如，检测发荧光的生物体的数量也可以在检测自身移动的生物体之前进行。

在该上下文中，术语“生物体”应被理解为任何种类的异养生物体，诸如浮游动物、原生动物、细菌等，以及任何种类的自养和杂养生物体，诸如浮游植物、蓝细菌等或者任何其他种类的单细胞或多细胞微生物体或微生物。

在该上下文中，术语“腔室”应被理解为在分析液体样品时适合容纳液体样品的任何种类的容器、小杯、空间等。由于在大多数情况下，通过位于腔室外部的装备分析样品，因此如果腔室的一侧或多侧透明是有利的。