[发明专利]CpG寡脱氧核苷酸、免疫组成物及其用途

说明书

本发明提供一种CpG寡脱氧核苷酸(CpG‑ODN)，CpG‑ODN包含一个或多个重复的GTCGTT序列、一个或多个重复的GTT序列、以及一个或多个重复的TTTT序列，其中至少一个重复的GTCGTT序列是编码在GTT序列及TTTT序列之间。本发明还包含CpG‑ODN的免疫组成物及其在制备治疗或预防宿主疾病的免疫反应的药物用途。

技术领域

本发明涉及CpG-寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)、包含其的免疫组成物以及藉其诱发免疫反应的方法，具体而言，是涉及一种用于诱发TLR9-活化免疫反应和/或一种TLR-21-活化免疫反应且包含GTCGTT片段的CpG-ODN、包含其的免疫组成物以及藉其诱发该些免疫反应的方法。

背景技术

CpG-寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)为已知具有潜力的免疫调控者，其诱发发炎性细胞介素及辅助型T细胞1(Th1)极化免疫反应，导致抗原呈现细胞中的共刺激分子的表现以及增加的B细胞、T细胞、自然杀手细胞、及其他免疫细胞的活化情况。

通常，不同的CpG-ODN基于其组成及长度而具有种族特异性活性。举例而言，含有两重复的GACGTT片段且长度为20个核苷酸的CpG-1826(SEQ ID NO:4)相较于含有三重复的GTCGTT片段且长度为22个核苷酸的CpG-2007(SEQ ID NO:11)，对小鼠细胞的活化较为有力，而对人类细胞的活化效率较低。因此，已有设计并人工合成用于诱发特定物种中特定受体的免疫反应的不同种类的CpG-ODN。

另一方面，通过CpG-PDN活化的目标受体的选择亦为降低成本及普及以CpG-ODN为基础之治疗的重点。许多研究者已发现，由于类铎受体(TLR)在先天免疫系统中所扮演的重要角色，利用其作为在宿主内通过CpG-ODN诱发的目标可为较佳的选择。举例而言，斑马鱼(Daniorerio)、河豚(Takifugu rubripes)、以及鸡(Gallus gallus)中的TLR21显示出其可被CpG-ODN所活化(Brownlie R.et al.Molecular immunology.2009；46(15):3163-70)。

然而，不同的物种表现不同类型的TLR，其可在适用于对应物种之不同类型的CpG-ODN的开发上造成非必要的成本。因此，开发可诱发复数种类型的TLR的，亦即可诱发不同物种之免疫反应，且具有较佳活化效果的单一CpG-ODN为上述问题实质上的解决方法。

发明内容

在本发明中，表现TLR21及TLR9两者的石斑鱼细胞及表现TLR9的哺乳类细胞系用于本发明的CpG-ODN的活化效应测试中，以呈现该CpG-ODN为有力于通过活化不同类型的TLR以诱发不同物种中免疫反应。

在本发明中，提供一种CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)，其是用于诱发宿主内TLR9-活化免疫反应、TLR21-活化免疫反应或其组合，包含：一个或多个重复的GTCGTT序列、一个或多个重复的GTT序列、以及一个或多个重复的TTTT序列，其中至少一个重复的GTCGTT序列是编码在GTT序列及TTTT序列之间。

优选地，CpG-ODN包含如SEQ ID NO:1所示的序列。

优选地，CpG-ODN的长度为19个核苷酸。

优选地，CpG-ODN包含如SEQ ID NO:2所示的序列。

优选地，CpG-ODN包含如SEQ ID NO:3所示的序列。

优选地，宿主是选自由人类、禽鸟类、啮齿类及鱼类所组成的群组中。

本发明提供一种免疫组成物，其是用于诱发TLR9-活化免疫反应、TLR21-活化免疫反应或其组合，包含：一种CpG-ODN，其包含：一个或多个重复的GTCGTT序列；一个或多个重复的GTT序列；以及一个或多个重复的TTTT序列，其中至少一个重复的GTCGTT序列是编码在GTT序列及TTTT序列之间；以及载体、赋形剂或其组合。