[发明专利]猪圆环病毒3型全基因组扩增方法及其PCR引物在审
| 申请号： | 201810006490.4 | 申请日： | 2018-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN110184282A | 公开（公告）日： | 2019-08-30 |
| 发明（设计）人： | 付朋飞;张学贤;马良;赵亚荣 | 申请（专利权）人： | 北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心;福州大北农生物技术有限公司;北京科牧丰生物制药有限公司;北京大北农科技集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/34 | 分类号： | C12N15/34;C12N15/11;C12Q1/70 |
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| 地址： | 100098 北京市海淀区杏石*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 猪圆环病毒 扩增 全基因组序列 引物 全基因组 特异性检测引物 流行病学调查 目的片段 遗传进化 作用位置 对引物 病毒 修正 补充 分析 | ||
1.一种猪圆环病毒3型全基因组，其序列如Seq ID No.1所示。
2.一对用于扩增猪圆环病毒3型全基因组的引物，其为：
P1：5-ACCCAGGACAAAGCCTCTTC-3(Seq ID No.2)；
P2：5-GGGTGAGCGCTGGTAGTTCC-3(Seq ID No.3)。
3.一对修正引物，用所述引物的扩增片段对权利要求2所述的P1、P2引物作用位置进行修正，其序列为：
P3：5-ATAAGATACTAAAGATGAAAGTTACAC-3(Seq IDNo.4)；
P4：5-TTAGAGAACGGACTTGTAACG-3(Seq ID No.5)。
4.一种测定猪圆环病毒3型全基因组序列的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)提取携带猪圆环病毒3型的猪病料DNA；
2)用权利要求2所述引物对提取的病料DNA进行猪圆环病毒3型全基因组PCR扩增，用权利要求3所述引物对提取的病料DNA进行PCR扩增；
3)对权利要求2所述引物扩增的片段和权利要求3所述引物扩增的片段分别进行测序；
4)利用序列分析软件对P1/P2引物扩增的全基因序列进行分析，结合P3/P4引物扩增得到的修正序列对P1/P2引物作用位置进行修正，得到猪圆环病毒3型全基因组序列。
5.一种体外检测猪圆环病毒3型的方法，其包括如下步骤：
1)提取待检病料DNA；
2)用权利要求2所述引物对提取的病料DNA进行猪圆环病毒3型全基因组PCR扩增；
3)对扩增的片段进行测序，得到猪圆环病毒3型全基因组序列。
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