[发明专利]一种细胞软骨基质及其制备方法

权利要求书

1.一种脱细胞软骨基质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、对关节软骨杀菌，除去所述关节软骨上的软骨膜，在低渗溶液中粉碎成软骨颗粒后以50-300rpm/min的速度震荡24-72h得到第一软骨；

(2)、所述第一软骨与离子表面活性剂在温度为37-40℃、转速为50-300rpm/min的条件下振荡3-6h得到第二软骨；

(3)、所述第二软骨与胰酶以及核酸酶在温度为37-40℃、转速为50-300rpm/min的条件下振荡0.5-2h，得到脱细胞关节软骨支架；

(4)、将所述脱细胞关节软骨支架先在紫外线下照射1-3h后，再浸入交联剂中反应2-6h后，最后进行干燥得到。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述杀菌按照如下方式进行：将所述关节软骨放入3-6℃的无菌青链霉素中浸泡2-8h。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述低渗溶液选自质量浓度为0.5％-1％的TritonX-100和质量浓度为0.5％-1％的Tris-HCl中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述离子表面活性剂是质量浓度为0.5％-2％的SDS或APG。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述胰酶1-10u/ml的胰酶；所述核酸酶为50-100u/ml的DNA核酸酶和1-10u/ml的RNA核酸酶。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，紫外照射之前，将所述脱细胞关节软骨支架置于聚乙烯模具中成型。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述紫外线的波长为240-250nm，所述聚乙烯模具距离紫外线发光装置的距离为10-30cm。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，交联剂为：将碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的至少一种溶于乙醇中得到的混合溶液；所述乙醇与所述混合溶液的体积百分比为40％-95％。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述干燥的方式为冷冻干燥。

10.一种如权利要求1-9任一项所述的脱细胞软骨基质的制备方法制备得到的脱细胞软骨基质。