[发明专利]一种含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法及应用

说明书

本发明提供了一种含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法及应用，属于生物工程领域。本发明通过复苏培养含有猪溶血素基因质粒的宿主菌菌液，并进行连续多代的传代培养，间隔一定的代数取样并检测，通过检测人工保藏的含有猪溶血素基因质粒的宿主菌的遗传稳定性，为研究猪溶血素基因提供可靠的支撑和保障；将上述检测方法应用到猪溶血素基因培养中，也可以为猪溶血素基因的研究和培养提供参考和借鉴，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及生物工程领域，具体而言，涉及一种含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法及应用。

背景技术

溶血素(hemolysin/haemolysin)，又称细胞溶素(cy-totoxin)，溶血素属于穿孔毒素(pore-forming toxin)，又名攻膜毒素(Mem-brane disrupting type)；猪链球菌溶血素是猪链球菌的主要毒力因子和宿主保护性抗原之一。

猪链球菌病在各地均有发生，给养猪业造成了极大的影响和较大的经济损失。目前很少有针对含有猪溶血素基因的宿主菌人工保藏的稳定性的研究。

发明内容

本发明的第一目的在于提供含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法，通过本检测方法，可以对含有猪溶血素基因的的质粒遗传稳定性有较为可靠的认识，为猪溶血素基因的研究提供可靠的支持。

本发明的第二目的在于提供上述含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法在猪溶血素基因研究中的应用。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

一种含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法，包括：

于液体培养基中培养含有猪溶血素基因的质粒的宿主菌菌液；

连续传代培养宿主菌菌液；

间隔取样传代培养的宿主菌菌液并进行遗传稳定性检测。

上述含有猪溶血素基因的质粒遗传稳定性的检测方法在猪溶血素基因研究中的应用。

本发明的有益效果为：本发明通过复苏培养含有猪溶血素基因的质粒的宿主菌菌液，并进行连续多代的传代培养，间隔一定的代数取样并检测，通过检测人工保藏的含有猪溶血素基因质粒的宿主菌的遗传稳定性，为研究猪溶血素基因提供可靠的支撑和保障；将上述检测方法应用到猪溶血素基因培养中，也可以为猪溶血素基因的研究和培养提供参考和借鉴，具有重要的应用价值。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实验例4提供的第5代大肠杆菌的菌落形态图；

图2为本发明实验例4提供的第15代大肠杆菌的菌落形态图；

图3为本发明实验例4提供的第25代大肠杆菌的菌落形态图；

图4为本发明实验例4提供的第40代大肠杆菌的菌落形态图；

图5为本发明实验例4提供的第5代大肠杆菌PCR电泳结果图；

图6为本发明实验例4提供的第15代大肠杆菌PCR电泳结果图；

图7为本发明实验例4提供的第25代大肠杆菌PCR电泳结果图；

图8为本发明实验例4提供的第40代大肠杆菌PCR电泳结果图；

图9为本发明实验例4提供的第5代大肠杆菌生化实验结果图；