[发明专利]LP-PLA2抗体及其用途

说明书

本发明公开了一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其结合LP‑PLA2分子。本发明还公开了上述单克隆抗体或其抗原结合部分在制备诊断心脑血管疾病的产品中的用途。本发明的LP‑PLA2抗体，能高效特异地结合LP‑PLA2分子，能诊断冠心病、缺血性卒中等心脑血管疾病，灵敏度高，特异性强，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及基因工程抗体技术领域，尤其涉及一种抗LP-PLA2抗体及其用途。

背景技术

脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)是具有血管特异性的炎症标志物，研究发现LP-PLA2为冠心病和缺血性卒中的独立危险因素。最近美国FDA批准其用于预测冠心病和缺血性卒中风险。

LP-PLA2是磷脂酶超家族中的亚型之一，也被称为是血小板活化因子乙酰水解酶，由血管内膜中的巨噬细胞、T细胞和肥大细胞分泌。动脉粥样硬化斑块中LP-PLA2表达上调，并且在易损斑块纤维帽的巨噬细胞中强表达。LP-PLA2可水解氧化低密度脂蛋白ox-LDL中的氧化磷脂，生成脂类促炎物质，如G蛋白偶联受体132(GPR132)，进而产生多种致动脉粥样硬化作用，包括内皮细胞死亡和内皮功能异常，刺激粘附因子和细胞因子的产生。这些物质可通过趋化炎症细胞进一步产生自我强化的循环，生成更多促炎物质。

发明内容

本发明要解决目前对LP-PLA2活性检测缺乏特异抗体的技术问题，提供一种识别LP-PLA2的特异性抗体，能对LP-PLA2活性进行高效特异检测。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:

在本发明的一个方面，提供了一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其结合LP-PLA2分子。

在本发明中，所述“抗体”应该解释为涵盖具有所需特异性的结合结构域的任意特异性结合因子。因而，这个术语涵盖了与之同源的抗体片段、衍生物以及抗体的功能等同物和同源物，也包括含有抗原结合结构域的任何多肽，无论是天然的还是合成产生的。抗体的实例是免疫球蛋白亚型(如IgG，IgE，IgM，IgD和IgA)及其亚型亚类；也可以是包含抗原结合结构域的片段如Fab、scFv、Fv、dAb或Fd，或者双链抗体(diabodies)。融合至另一多肽的、包含抗原结合结构域的嵌合体分子或者等同物也包括在其中。嵌合抗体的克隆与表达在EP.A-0120694和EP.A-0125023中有所描述。

本发明所述单克隆抗体可以是单价的或是单链抗体、双链抗体、嵌合抗体以及上述抗体的衍生物、功能等同物和同源物，也包括抗体片段和含有抗原结合结构域的任何多肽。

抗体可以通过许多方式修饰，可用DNA重组技术来产生保留原来抗体特异性的其它抗体或嵌合分子。这种技术可以包括将编码抗体的免疫球蛋白可变区或互补性决定区(CDRs)的DNA引入不同免疫球蛋白的恒定区或恒定区加框架区。还可以对杂交瘤细胞或产生抗体的其它细胞进行遗传突变或其它改变，这可以改变或者不改变所产生抗体的结合特异性。

本发明所述单克隆抗体除了重链和轻链中的高度可变区CDR1、CDR2和CDR3和连接序列外，其它为框架区。框架区可在结合所需的三维结构不受影响的条件下被其他序列置换，抗体特异性的分子基础主要来自于它的高度可变区CDR1、CDR2和CDR3，这些区域是与抗原结合的关键部位。为维持优选的结合特性，CDR的序列应尽可能保留，然而，可能需要一些氨基酸改变使结合特性最优化。

本发明所述单克隆抗体在人源化过程中，为了保持抗体与LP-PLA2的结合活性，对于框架区的关键氨基酸位点予以保留(即回复突变位点)，这些氨基酸对于人源化以后的抗体活性有着至关重要的作用。

拥有这些取代位置中任一个取代位置的抗体和拥有所有取代位置的抗体同样具有结合LP-PLA2的活性。氨基酸取代可同时存在于框架区和CDR区，或单独出现在框架区或CDR区。