[发明专利]半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是涉及一种半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用。

背景技术

半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)又称并头草、韩信草、赶山鞭、牙刷草，为唇形科黄芩属植物的干燥全草，全草可入药，在我国有较为广泛的分布，资源丰富。

迄今为止对半枝莲的成分及药理作用有较为深入的研究，重点主要集中在黄酮类和生物碱类化合物，研究发现半枝莲提取物具有调节免疫系统、抗菌抑瘤、清热解毒、化瘀利尿、抗癌抗衰老等一系列功效，在临床实践上发挥了极大地作用。另外，多糖也是半枝莲的主要成分之一，半枝莲均一多糖能够剂量依赖性的抑制小鼠组织匀浆的自氧化以及体外脂质过氧化，增加巨噬细胞的吞噬能力以及血清溶血素抗体生成能力，此外半枝莲均一多糖可明显抑制肿瘤细胞的增殖同时增加机体免疫功能。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种半枝莲均一多糖提取物及其制备方法和应用。

具体地说，本发明的第一方面是提供了一种半枝莲均一多糖提取物，所述半枝莲均一多糖提取物由如下方法制得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。

本发明的第二方面是提供了一种半枝莲均一多糖提取物的制备方法，所述方法包括：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。

本发明还提供了所述半枝莲提取物在制备抑制人结肠癌细胞转移的药物中的应用。

本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本发明的特点、目的和优势将更为明显。

附图说明

图1半枝莲均一多糖HPLC图，单一对称峰表明多糖为均一多糖

图2半枝莲均一多糖对HT-29细胞的毒性检测，无毒性抑制作用

图3半枝莲均一多糖对TGF-β1诱导的HT-29细胞转移能力的影响，显著抑制肿瘤细胞的转移

图4半枝莲均一多糖对TGF-β1诱导的HT-29细胞侵袭能力的影响，显著抑制肿瘤细胞的侵袭

图5半枝莲均一多糖对肿瘤细胞转移标志性蛋白的调控作用，显著促进上皮标志性蛋白的表达，抑制间质细胞标志性蛋白的表达

图6半枝莲均一多糖对裸鼠体内肿瘤肝转移的影响，可显著抑制肿瘤细胞的肝转移能力

具体实施方式

本发明的问世部分是基于这样一个意外发现：用本发明的工艺提取获得的半枝莲均一多糖可以有效抑制肿瘤细胞转移。因此，该植物提取物可有望开发成为一种抗肿瘤转移的药物。

具体而言，本发明的半枝莲均一多糖提取物可通过本发明的如下工艺从半枝莲中提取获得：将半枝莲粉碎，用75％乙醇80℃回流提取2次，提取时间分别是3h和2h，料液比分别为1:10和1:8；然后将醇提后的药渣经挥干乙醇后，再用水提取3次，提取时间分别是3h、3h和2h，料液比分别为1:10、1:10和1:8；合并3次水提液，浓缩至料液比为1:1.5；在4000r/min转速下离心浓缩液15min，取上清液，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜，离心取沉淀冷冻干燥得半枝莲粗多糖；最后经DEAE色谱柱层析和Superdex凝胶柱纯化得半枝莲均一多糖提取物。

本发明的半枝莲均一多糖提取物可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本发明的半枝莲提取物及可药用载体。较佳地，本发明的药物组合物含有0.1～99.9％重量百分比的作为活性成分的本发明的半枝莲均一多糖提取物。“可药用载体”不会破坏本发明的半枝莲均一多糖提取物的药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用量对人体无毒。