[发明专利]一种利用共轭聚合物对微生物进行快速区分的方法有效
申请号: | 201810012548.6 | 申请日: | 2018-01-05 |
公开(公告)号: | CN108303404B | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
发明(设计)人: | 李立东;王晓瑜;朱书贤 | 申请(专利权)人: | 北京科技大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 皋吉甫 |
地址: | 100083*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 共轭 聚合物 微生物 进行 快速 区分 方法 | ||
1.一种利用共轭聚合物对微生物进行快速区分的方法,其特征在于包括以下步骤:
步骤一、进行微生物培养,将得到的微生物溶于一定溶剂得到微生物样品溶液A;将共轭聚合物溶于灭菌水,得到溶液B,
其中,所述微生物为革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌和真菌的一种或几种;
所述共轭聚合物为具有以下结构通式所示的共轭聚合物:
,
其中,n为0.8-0.95;
步骤二、将步骤一微生物样品溶液A注入溶液B以一定的比例混合,迅速混合均匀,得到溶液C;
步骤三、采用荧光光谱仪在一段时间内连续测试所述溶液C,得到溶液C的荧光光谱;
步骤四、对步骤三所测的荧光光谱的测试结果进行处理,对处理结果进行判别分析,
具体步骤为:首先得到溶液C的荧光光谱,
其次,从荧光光谱中选取溶液C在测试时间内某一时刻t的波长为L处的荧光值At和在测试时间内某一时刻t的L1处的荧光值Dt,代入以下公式求δ值:公式为:
或,
式中,At为溶液C在t时刻的荧光值;A0为溶液B位于所述波长为L处的荧光值,L的取值范围为620nm-680nm;Dt为溶液C在t时刻的荧光值;D0为溶液B位于所述波长为L1处的荧光值,L1的取值范围为410nm-460nm。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中,所述溶剂为灭菌水,磷酸盐缓冲液,三羟甲基氨基甲烷缓冲液、有机酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和两性离子缓冲液的一种。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中,所述微生物样品溶液A的浓度采用紫外分光光度计测定的OD600为1×10-5-2。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中,所述溶液B的浓度为1×10-3-1×104μM。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤二中,所述微生物样品溶液A与溶液B的体积比为1:10-1000。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤三中,所述溶液C的荧光光谱的测试时间为1-60 分钟,每次测试间隔为10-300秒。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤四中,所述对处理结果进行判别分析方法采用主成分分析,线性判别分析,广义判别分析,局部线性嵌入或多维缩放中的一种。
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