[发明专利]一种海洋生物标本的防霉方法

说明书

本发明涉及动物标本防霉技术领域，尤其是一种海洋生物标本的防霉方法；用沾有酒精的棉签在标本上划出若干同等面积的区域，用酒精将各区域擦拭干净，待各区域内的酒精蒸发完全后，分别涂上多菌灵溶液；定时观察记录；本发明中使用的多菌灵防霉剂的浓度是安全无毒的，且对皮肤无刺激性，无致敏性；本发明的动物标本防霉方法，最低抑制浓度低，防霉效果好，采用0.02ppm的多菌灵溶液，动物标本在长达30天的时间内未长霉菌。

技术领域

本发明涉及动物标本防霉技术领域，尤其是一种海洋生物标本的防霉方法。

背景技术

动物的种类繁多，不同种类的动物其标本制作和保藏的方法也不相同，按制作方法可将动物标本分为剥制标本、浸制标本、骨骼标本、干制标本及包埋标本等，制成的动物标本理论上可以永久保存。然而，受限于各种主客观条件，动物标本在保存过程中时常会遭遇各种各样危害因素的损害，导致标本在使用寿命大为缩短。

在损害动物标本的诸多因素中，以霉菌的危害最为严重。在潮湿的环境下，霉菌非常容易在标本上大量滋生，导致标本发生霉变。由于霉菌初生时的孢子肉眼难辨，所以很容易被人们忽略，但等长出菌落，被人们看到形成霉斑时，动物标本已受到了严重的损害。霉菌对动物标本的损害，轻则导致皮毛褪色、脱落影响标本的表面美观，重则导致标本膨胀变形、变碎、腐烂，造成毁灭性的破坏。更重要的是霉菌对参观者的身体健康造成严重损害。

菌灵(又名棉萎灵、苯并咪唑44号)。多菌灵是一种广谱性杀菌剂，对多种作物由真菌(如半知菌、多子囊菌)引起的病害有防治效果。

目前国内外还没有人将多菌灵用在标本防霉上，同时国内外目前还没有关于对海洋生物标本霉变的防治这一方面的研究。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种安全、环保且不会对标本产生不良影响的海洋生物标本的防霉方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种海洋生物标本的防霉方法，所述防霉方法包括以下步骤：

(1)霉变菌株的采集和分离纯化：用灭过菌的采样管和棉签采集海洋生物标本上的霉变菌株，将无菌操作采集到的霉变样品接种于PDA平板中，于28℃恒温培养箱中倒置培养3-5d后，用接种环挑取平板上的单菌落，划线接种于空白PDA平板上，继续培养；待菌落在平板生长进入旺盛期时，用无菌接种环挑取少量孢子作平板划线，重复2-3次平板划线直至得到纯培养菌株；

(2)霉菌的形态学鉴定：步骤(1)中的纯培养菌株再经观察菌落形态和菌株显微形态，去除酵母菌和重复菌株，得到品种不同的霉菌；

(3)rDNA-ITS测序鉴定：用真菌DNA提取试剂盒提取DNA，采用引物扩增rDNA-ITS，然后测序；对所测得的ITS序列和从GenBank中通过Blast检索获得的参考序列进行多重对位排比，并构建系统发育树，系统树每个分支的统计学显著性分析以Bootstrap方法进行检验；

(4)步骤(3)中得到的霉菌的抑制试验：霉菌的抑制剂采用多菌灵，抑制试验采用滤纸片法，从而得到各种霉菌的多菌灵的最低抑制浓度和最适宜抑制浓度；

(5)生物标本防霉处理：用沾有酒精的棉签在标本上划出若干同等面积的区域，用酒精将各区域擦拭干净，待各区域内的酒精蒸发完全后，分别涂上多菌灵溶液，然后常温放置。

优选的，所述步骤(1)还包括将纯培养菌株接种于20％甘油中于-20℃低温保存。

优选的，所述步骤(2)还包括将霉菌制成20％甘油菌悬浮液-20℃低温保种。

优选的，所述引物为ITS1：5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'，ITS4：5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3'PCR。