[发明专利]一种利用两个Lemont的纹枯病抗性基因的方法

说明书

本发明公开了一种利用两个Lemont的纹枯病抗性基因的方法。该方法是利用D550、D856标记分别PCR扩增Lemont和扬稻4号组配的重组自交系分离群体内的不同株系，选出D550标记扩增的带型与Lemont带型相同的株系，且D856标记扩增的带型与Lemont带型相同的株系，即是携带两个来自Lemont的纹枯病抗病等位基因的双抗纹枯病的水稻株系。该方法可同时聚合2个纹枯病抗病基因获得抗纹枯病的水稻材料，可大大提高育种效率。

技术领域

本发明涉及一种利用两个Lemont的纹枯病抗性基因的方法，该方法可利用两个分子标记快速选育出在qSBRLEYD5B与qSBRLEYD8B基因座位上聚合了两个纹枯病抗性基因的抗纹枯病的水稻新株系。

背景技术

水稻是关乎我国粮食安全的重要粮食作物。我国水稻育种界选育纹枯病抗病水稻的传统方法都是通过表型选择进行的，即用纹枯病致病菌在不同的水稻发育时期对水稻单株进行接种鉴定。由于传统的接种鉴定大部分是在田间种植条件下进行的，接种鉴定的结果误差大，准确性差，而且不同年份的接种结果存在差异，导致接种鉴定结果的准确率低。通过分子标记对水稻纹枯病抗性相关基因进行选择可以在水稻苗期即对纹枯病抗性进行选择，选择的准确率高，可以大大提高育种效率。水稻的纹枯病抗性是一个数量性状，受多个数量性状基因座位(QTL)控制。水稻科研界目前已经定位出许多与水稻纹枯病抗性相关的QTL，但是哪些QTL是共同调控水稻纹枯病抗性的？哪些QTL可以同时应用在一个育种过程中？我们对这些问题的了解并不多。根据目前已经报道的与水稻纹枯病抗性基因连锁的分子标记随意将两个不同的抗性基因聚合在一起，希望获得抗性加强的水稻材料这样一个美好的想法在实际操作过程中往往不可行，因为随意选出的两个抗性基因很有可能存在基因之间的上位性互作效应，导致聚合了2个抗性基因的材料的纹枯病抗性反而降低了。为了有效的提高育种效率，加快育种进程，本发明提出一种利用D550和D856两个分子标记快速选育聚合了qSBRLEYD5B与qSBRLEYD8B两个纹枯病抗性基因的水稻新株系的方法。本发明相比传统的利用纹枯病致病菌进行接种鉴定的表型选择方法更简便快速，无需进行传统的纹枯病菌接种鉴定，而且相比接种鉴定方法的准确度更高，因此大大提高了育种效率。

发明内容

本发明包括以下步骤：

(1)将水稻品种Lemont作为母本与水稻品种扬稻4号作为父本进行杂交，并构建重组自交系分离群体Fn，所述Fn中的n≥5；

(2)用分子标记D550与D856分别PCR扩增步骤(1)获得的重组自交系分离群体内的不同株系的叶片DNA，根据D550标记与水稻第5染色体上的纹枯病抗性基因qSBRLEYD5B连锁的特点，并根据D856标记与水稻第8染色体上的纹枯病抗性基因qSBRLEYD8B连锁的特点，将D550与D856标记的PCR扩增产物分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，选出D550标记扩增的带型与Lemont带型相同的株系，且D856标记扩增的带型与Lemont带型相同的株系，即是在qSBRLEYD5B与qSBRLEYD8B基因座位上携带两个纹枯病抗病等位基因的双抗纹枯病的稳定的水稻株系；选出D550标记扩增的带型与扬稻4号带型相同的株系，且D856标记扩增的带型与扬稻4号带型相同的株系，即是在qSBRLEYD5B与qSBRLEYD8B基因座位上携带两个纹枯病感病等位基因的双感纹枯病的稳定的水稻株系。

进一步地，所述步骤(2)中，D550标记扩增的带型与Lemont带型相同的株系，代表的是在qSBRLEYD5B基因座位上携带纹枯病抗病等位基因的株系；D550标记扩增的带型与扬稻4号带型相同的株系，代表的是在qSBRLEYD5B基因座位上携带纹枯病感病等位基因的株系；D856标记扩增的带型与Lemont带型相同的株系，代表的是在qSBRLEYD8B基因座位上携带纹枯病抗病等位基因的株系；D856标记扩增的带型与扬稻4号带型相同的株系，代表的是在qSBRLEYD8B基因座位上携带纹枯病感病等位基因的株系。