[发明专利]一种比值式检测HNO的纳米荧光探针及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种比值式检测HNO的纳米荧光探针的制备方法和应用。本发明所述纳米荧光探针由化合物P‑BODIPY‑R经两性聚合物包裹制得；所述化合物P‑BODIPY‑R结构通式如下：其中R₁、R₂为引入的取代基，可调节荧光探针分子中的电子效应，使其响应HNO时荧光发生比值式变化。本发明提供的纳米荧光探针可用于比值式检测生物体内的活性小分子HNO。本发明中通过引入两性聚合物并包裹荧光探针小分子P‑BODIPY‑R制备纳米胶束，使探针小分子生物兼容性得到极大的改善，同时该纳米荧光探针对HNO选择性较好，抗干扰能力更强，具有更高的灵敏性，可对活体细胞内和斑马鱼体内的HNO进行实时跟踪检测。

技术领域

本发明属于生物化工领域，涉及构建一种可用于检测生物体内HNO的新型比值式纳米荧光探针，具体涉及一种检测HNO的纳米荧光探针的制备方法和生物应用。

背景技术

BODIPY类化合物是一种性能优异的荧光染料，其具有较高的荧光量子产率，通过硼桥键和甲川键把两个吡咯环固定在一个平面上，使分子具有刚性共平面结构，在激发光的作用下能产生较为强烈的荧光，并且其高度的刚性共平面结构使其具有较高的摩尔消光系数、较好的光化学与光物理稳定性、激发波长在可见光区、半峰宽较窄等优点，此外其结构易于修饰，可调节发射波长至近红外区。这些优点使其在生物应用（特别是作为荧光探针的信号检测基团）方面得到广泛的重视。目前合成此类染料的研究工作仍存在不足，如设计的荧光探针分子的水溶性差、检测范围比较局限、大部分用于检测外源性的小分子等。

发明内容

本发明第一个目的是提供一种比值式检测HNO的水溶性较好的纳米荧光探针。

本发明第二个目的是提供一种比值式检测HNO的纳米荧光探针的制备方法。

本发明第三个目的是提供一种比值式检测HNO的纳米荧光探针在检测细胞内HNO的应用。

本发明第四个目的是提供一种比值式检测HNO的纳米荧光探针在检测斑马鱼体内HNO的应用。

本发明第五个目的是提供一种比值式检测HNO的化合物。

本发明第六个目的是提供一种比值式检测HNO的化合物的制备方法。

本发明第七个目的是提供一种比值式检测HNO的化合物在检测细胞内HNO的应用。

本发明第八个目的是提供一种比值式检测HNO的化合物在检测斑马鱼体内HNO的应用。

本发明的技术方案如下：

一种检测HNO的比值式纳米荧光探针，其特征在于，所述纳米荧光探针由化合物P-BODIPY-R经两性聚合物包裹而制得；

所述小分子化合物P-BODIPY-R结构通式如下：

其中R₁、R₂为引入的取代基（R₁为具有给电子的胺基取代基团，R₂为一般性不具有强推拉电子效应的基团），可调节荧光探针分子中的电子效应，使其响应HNO时荧光发生比值式变化。

所述化合物HO-BODIPY-R具有如下所示结构：

其中R₁、R₂为引入的取代基（R₁为具有给电子的胺基取代基团，R₂为一般性不具有强推拉电子效应的基团），可调节荧光探针分子中的电子效应，使其响应HNO时荧光发生比值式变化。

根据本发明所述比值式检测HNO的纳米荧光探针为纳米胶束，所述纳米胶束外层为两性聚合物，内部为化合物P-BODIPY-R。