[发明专利]一种g-C3N4@Hemin复合物模拟酶的制备与应用

权利要求书

1.一种g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

取三聚氰胺粉末放于磁舟中，置于马弗炉于氮气中550℃加热裂解4-6h后自然冷却至室温，得到淡黄色g-C₃N₄粉末；取g-C₃N₄粉末分散于去离子水中使其浓度为50mg/mL-100mg/mL，超声分散16h，以11000rpm的转速离心5min以除去残留的未剥离的g-C₃N₄，将含有g-C₃N₄纳米片的上清液在60℃下烘干备用；

取已烘干的g-C₃N₄纳米片分散于去离子水中使其浓度为2mg/mL,取血红素分散于去离子水中使其浓度为1mg/mL-5mg/mL，将两溶液按照体积之比1:1混合，于水浴中65℃恒温反应8-10h，自然冷却至室温后，得到混合溶液；将混合溶液在11000rpm下离心，采用无水乙醇和蒸馏水洗涤3-5次，所得沉积物于60℃下烘干，即得g-C₃N₄@Hemin复合物。

2.根据权利要求1所述的一种g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶的制备方法，其特征在于：所述的g-C₃N₄@Hemin复合物具有过氧化物酶样催化活性，最适pH值为4.0，最适温度值为40℃。

3.利用权利要求1所述的g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶比色检测过氧化氢，其特征在于，包括以下步骤：

配置一系列浓度为5μmol/L-500μmol/L的过氧化氢水溶液，向离心管中加入100μL浓度为2μmol/LTMB溶液，然后加入上述不同浓度的过氧化氢水溶液，再加入100μL浓度为50μg/mL的g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶分散液，最后向上述溶液中加入pH4.0浓度为0.2mmol/L的HAc-NaAc缓冲液至溶液总体积为3mL，于40℃水浴条件下恒温反应10min后滴加20μLH₂SO₄终止反应，H₂SO₄的体积浓度为20％，通过紫外-可见光谱检测其在652nm处的吸光度，再根据吸光度对过氧化氢浓度作图。

4.利用权利要求1所述的g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶比色检测葡萄糖，其特征在于，包括以下步骤：

首先向离心管中加入1mL的pH7.4浓度为0.2mmol/L的磷酸盐缓冲溶液，再分别加入100μL的10μmol/L-500μmol/L不同浓度的葡萄糖溶液，然后加入10μL浓度为5mg/mL的葡萄糖氧化酶，摇匀，在37℃水域条件下反应1h，得混合液；向离心管中加入100μL浓度为2μmol/L的TMB溶液，再加入100μL浓度为0.5mg/mL的g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶分散液，最后向上述溶液中加入pH4.0，浓度为0.2mmol/L的HAc-NaAc缓冲液至溶液总体积为3mL，于40℃水浴条件下恒温反应10min后滴加20μLH₂SO₄终止反应，H₂SO₄的体积浓度为20％，通过紫外-可见光谱检测其在652nm处的吸光度，再根据吸光度对葡萄糖浓度作图。

5.利用权利要求1所述的g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶用于血清中葡萄糖的检测，其特征在于，包括以下步骤：

先向离心管中加入1mL的pH7.4浓度为0.2mmol/L的磷酸盐缓冲溶液，再加入100μL稀释过的血清溶液，稀释过的血清溶液为血清用去离子水稀释十倍后的溶液，然后加入10μL浓度为5mg/mL的葡萄糖氧化酶，在37℃水浴条件下反应1h，得混合液；向离心管中加入100μL浓度为2μmol/L的TMB溶液，再加入100μL浓度为0.5mg/mL的g-C₃N₄@Hemin复合物模拟酶分散液，最后向上述溶液中加入pH4.0，浓度为0.2mmol/LHAc-NaAc缓冲液至溶液总体积为3mL，于40℃水浴条件下恒温反应10min后滴加20μLH₂SO₄终止反应，H₂SO₄的体积浓度为20％，通过紫外-可见光谱检测其在652nm处的吸光度，将得到的吸光度值代入葡萄糖标准曲线中，确定血清中葡萄糖的含量。