[发明专利]一种卷边桩菇多糖提取物及其制备方法和医用用途

说明书

本发明提供一种卷边桩菇多糖提取物及其制备方法和医用用途，从天然菌物卷边桩菇中获得具有新颖结构和多种生物活性的多糖PIP2‑1；并在该多糖制备过程中创造性的增加了两次80%乙醇沉淀步骤改进了卷边桩菇粗多糖的溶解性和纯度，同时公开了该多糖具有抗氧化、免疫调节和保护神经细胞等功效，可用于制备治疗抗氧化、免疫调节和保护神经细胞的药物，为卷边桩菇后续的开发和利用提供研究基础，具有重要的经济价值和市场价值。

技术领域

本发明涉及一种卷边桩菇多糖提取物，具有抗氧化，免疫调节，保护神经细胞作用，本发明进一步提供了其制备方法，属于天然药物开发领域。

背景技术

随着生活水平的提高，人们逐渐增强了保健意识。另一方面，由于饮食不健康，工作压力大，环境污染，这些因素会使免疫力下降以及自由基增多而导致的氧化损伤等健康问题，随着年龄增长这些因素也是导致老年痴呆的原因之一。因此，开发具有抗氧化，免疫调节和保护神经细胞作用的药物或功能食品成为当务之急。

大型真菌是一种重要的天然生物资源，包括灵芝，虫草等在内的大型真菌由于其药效显著，副作用少，已成为药物开发的重要资源。卷边桩菇（Paxillus involutus），所属担子菌纲，伞菌目，广泛分布于北半球。“长白山植物药志”记录追风散寒，舒筋活络。主治手足麻木，筋络不舒，腰腿疼痛”。而目前，对卷边桩菇抗氧化，免疫调节和保护神经细胞等功能的开发未见报道。因此，对其进行药用价值的开发和利用具有重要意义。

发明内容

本发明涉及一种卷边桩菇多糖提取物，具有抗氧化，免疫调节，保护神经细胞作用，本发明进一步提供了其制备方法，

本发明所述的一种卷边桩菇多糖提取物，其特征在于由卷边桩菇通过乙醇提取得到。

本发明所述的卷边桩菇多糖提取物，其特征在于：卷边桩菇多糖提取物含量为82.96%，蛋白含量为3.1%，分子量为32 kDa；

该多糖由葡萄糖，甘露糖，半乳糖，岩藻糖组成，比例分别为62.2%, 2.8%，25.4%和9.6%；连接方式为T-岩藻糖、1,3-甘露糖、T-葡萄糖、1,4-葡萄糖、1,6葡萄糖、T-半乳糖、1,6-半乳糖、1,4,6-半乳糖及1,2,6-半乳糖。

本发明所述的卷边桩菇多糖提取物的制备方法，包括如下步骤：

1）将卷边桩菇烘干，粉碎过200目筛，将卷边桩菇菌粉在79℃，液料比为43.1 mL/g条件下提取3 h；提取液浓缩至原浓度1/5~1/4，加入无水乙醇至终浓度80%，沉淀，5000r/min离心去上清，沉淀烘干后，加入去离子水溶解，再加入终浓度为80%的乙醇沉淀，去上清后，用冷冻干机冷冻干燥备用；

2）将冻干的多糖样品加入去离子水溶解，通过3次sevag试剂(正丁醇：氯仿=1:4，v/v)去蛋白，再通过3500 Da截留量透析袋透析去除小分子，寡糖后浓缩并再通过80%乙醇沉淀，5000r/min离心去上清，沉淀通过冷冻干燥机冷冻干燥获得多糖卷边桩菇初级纯化多糖PIP；

3）将PIP用去离子水溶解，进行DEAE Cellulose-52(5.0×30 cm)柱层析，NaCl浓度由0~1 mol/L梯度洗脱，洗脱速度为1 mL/min，每管收集5 mL，通过苯酚-硫酸法测定多糖含量将含有多糖部分收集，分别获得多糖组分PIP1和PIP2，进一步将PIP2进行Sephadex-G100 (2.6×60 cm)层析，获得卷边桩菇多糖提取物PIP2-1。

本发明所述的卷边桩菇多糖提取物在制备免疫调节药物中的用途。

本发明所述的卷边桩菇多糖提取物在制备抗氧化药物中用途。

本发明所述的卷边桩菇多糖提取物在制备保护神经细胞药物中用途。