[发明专利]抗原-Fc融合蛋白及其检测阳性CAR-T细胞的应用

权利要求书

1.一种抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，其包含抗原和含有突变的Fc片段，所述突变的Fc片段的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示的序列。

2.根据权利要求1所述抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，所述抗原为全长蛋白分子或细胞跨膜蛋白的胞外结构域。

3.根据权利要求1所述抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，所述抗原为疾病相关的蛋白质抗原，优选地为肿瘤相关抗原；所述肿瘤相关抗原任选地为选自ErbB2(HER2/neu)、癌胚抗原(CEA)、上皮细胞黏附分子(EpCAM)、表皮生长因子受体(EGFR、EGFR变体III(EGFRvIII))、CD19、CD20、CD30、CD40、双唾液酸神经节苷脂GD2、GD3、C型凝集素样分子-1(CLL-1)、导管上皮粘蛋白、gp36、TAG-72、鞘糖脂、胶质瘤相关抗原、β-人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白(AFP)、凝集素反应性AFP、甲状腺球蛋白、RAGE-1、MN-CA IX、人端粒酶逆转录酶、RU1、RU2(AS)、肠羧基酯酶、mut hsp70-2、M-CSF、前列腺酶、前列腺酶特异性抗原(PSA)、PAP、NY-ESO-1、LAGA-1a、p53、前列腺蛋白、PSMA、存活蛋白和端粒酶、前列腺癌肿瘤抗原-1(PCTA-1)、MAGE、ELF2M、中性粒细胞弹性蛋白酶、肝配蛋白B2、CD22、胰岛素生长因子(IGF1)-I、IGF-II、IGFI受体、间皮素(MSLN)、呈递肿瘤特异性肽表位的主要组织相容性复合物(MHC)分子、5T4、ROR1、Nkp30、NKG2D、肿瘤基质抗原、纤连蛋白的额外结构域A(EDA)和额外结构域B(EDB)以及肌腱蛋白-C的A1结构域(TnC A1)以及成纤维细胞相关蛋白(fap)、LRP6、黑素瘤相关硫酸软骨素蛋白聚糖(MCSP)、CD38/CS1、MART1、WT1、MUC1、LMP2、独特型、NY-ESO-1、Ras突变体、gp100、蛋白酶3、bcr-abl、酪氨酸酶、hTERT、EphA2、ML-TAP、ERG、NA17、PAX3、ALK、雄激素受体；谱系特异性或组织特异性抗原如CD3、CD4、CD8、CD24、CD25、CD33、CD34、CD70、CD79、CD116、CD117、CD135、CD123、CD133、CD138、CTLA-4、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)、内皮糖蛋白、主要组织相容性复合物(MHC)分子、BCMA(CD269、TNFRSF 17)和FLT-3中任一种，优选地为选自CD19、MSLN、Muc1和EGFR中的任一种，更优选地为选自CD19的胞外结构域、MSLN的胞外结构域、Muc1的胞外结构域和EGFR的胞外结构域中的任一种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，其还包含接头，所述接头两端分别连接所述抗原和所述含有突变的Fc片段；优选地，所述接头为IgG分子铰链区，更优选地，所述接头为IgG4铰链区。

5.根据权利要求4所述抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，所述抗原位于所述接头的N端，所述含有突变的Fc片段位于所述接头的C端；或所述抗原位于所述接头的C端，所述含有突变的Fc片段位于所述接头的N端。

6.根据权利要求5所述抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，其N端或C端还含有一个或多个标签，优选地，所述标签为选自FLAG、HA、HA1、c-Myc、Poly-His、Poly-Arg、Strep-TagII、AU1、EE、T7、4A6、ε、B、gE和Ty1中的一种或多种。

7.根据权利要求5所述抗原-Fc融合蛋白，其特征在于，其氨基酸序列为选自SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:10中任一种。