[发明专利]肿瘤免疫细胞亚群精准分型的质谱流式检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种肿瘤免疫细胞亚群精准分型的质谱流式检测试剂盒，由42种带金属标签的抗体组成。本发明研发出42个通道42种抗体的试剂盒，利用质谱流式检测，可一次同时检测42种抗体，实现对肿瘤免疫细胞亚群精准分型。本发明试剂盒经测试，可以实现肿瘤疾病的所有免疫细胞亚群系统的、全面的、动态的、精准的分型，而且无需各通道单染对照，不需要计算补偿，节约样品。

技术领域

本发明涉及细胞生物学技术领域，具体涉及一种肿瘤免疫细胞亚群精准分型的质谱流式检测试剂盒。

背景技术

免疫系统在疾病的发生、发展、预后过程中起着重要作用。但是，目前的研究手段大多集中在研究几种免疫细胞亚群在疾病中的功能及分子机制。同时，由于技术手段的缺陷，导致以往的研究对各类免疫细胞亚群的定义不够准确，研究结果过于片面。比如传统流式细胞技术，荧光信号的交叠限制了荧光通道的数量增长，通道数目少，而且通道的发射光谱严重重叠，需要设置空白组、阴性对照组及各通道的单染组，进行复杂的补偿计算，样品消耗量巨大。

质谱流式细胞技术(Mass Cytometry,CyTOF)是近年来刚发展起来的单细胞分子分型技术。其使用金属元素作为抗体分子的标签并利用ICP质谱检测系统对单细胞表面及内部多种蛋白分子同时进行检测。与传统流式细胞技术相比，具有检测通道多、通道间无干扰、信号精度高及通量大等特点。

虽然美国Fluidigm公司的质谱流式细胞仪功能强大，并且拥有600多种金属预标记的抗体，但是，目前针对肿瘤患者外周血的免疫细胞亚群分析的研究，没有现成的试剂盒可以直接使用，而且通道数目也只有35个。预标记抗体购买渠道单一，成本昂贵且耗时长。国内也没有类似试剂盒产品的研发和生产。

因此，在对肿瘤疾病的免疫系统研究中，缺乏对所有免疫细胞亚群系统的、全面的、动态的、精准的描述。

发明内容

本发明目的是提供一种肿瘤免疫细胞亚群精准分型的质谱流式检测试剂盒，主要针对肿瘤患者外周血的免疫细胞亚群进行质谱流式检测，达到精准分型的目的，以解决现有技术的不足。

本发明采用以下技术方案：

一种肿瘤免疫细胞亚群精准分型的质谱流式检测试剂盒，由42种带金属标签的抗体组成，具体如下表所示：

其中，编号3、24、25、31、32、34、36为胞内抗体，其它为胞外抗体。

本发明的有益效果：

本发明研发出42个通道42种抗体的试剂盒，利用质谱流式检测，可一次同时检测42种抗体，实现对肿瘤免疫细胞亚群精准分型。本发明试剂盒经测试，可以实现肿瘤疾病的所有免疫细胞亚群系统的、全面的、动态的、精准的分型，而且无需各通道单染对照，不需要计算补偿，节约样品。

附图说明

图1至图4为实施例1中42种抗体染色效果图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做更进一步地解释。下列实施例仅用于说明本发明，但并不用来限定本发明的实施范围。

一种肿瘤免疫细胞亚群精准分型的质谱流式检测试剂盒，由42种带金属标签的抗体组成，具体如表1所示：

表1

试剂盒中的42种抗体使用42个通道，编号3、24、25、31、32、34、36为胞内抗体，其它为胞外抗体，可以鉴定所有的T细胞亚群，包括T、central memory T、effector T、effector memory CD4+T及CD8+T，和B细胞亚群等。