[发明专利]一种高效表达犬圆环病毒Cap蛋白的方法在审
| 申请号： | 201810031395.X | 申请日： | 2018-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN108264541A | 公开（公告）日： | 2018-07-10 |
| 发明（设计）人： | 孙文超;赵翠青;鲁会军;李霄;金宁一;田明尧;汪伟;曹亮 | 申请（专利权）人： | 温州大学 |
| 主分类号： | C07K14/01 | 分类号： | C07K14/01;C12N15/34;C12N15/70 |
| 代理公司： | 温州市品创专利商标代理事务所(普通合伙) 33247 | 代理人： | 程春生 |
| 地址： | 325000 浙江省温州市瓯海*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高效表达 圆环病毒 大肠杆菌 重组质粒 核定位信号肽 感受态细胞 核定位信号 特异性引物 亚单位疫苗 流行病学 免疫原性 模板序列 完整序列 序列连接 诱导表达 在线预测 表达量 基因组 氨基酸 截取 蛋白 转入 诊断 应用 分析 成功 研究 | ||
【权利要求书】：
1.一种高效表达犬圆环病毒Cap蛋白，其特征包括以下步骤：
(1)以CanineCV基因组为模板序列，设计特异性引物，PCR扩增实现CanineCV去核定位信号肽的Cap蛋白序列；
(2)将步骤(1)扩增获得的基因片段，连接到pET-28a载体中，构建重组质粒pET(28a)-Cap。
(3)将步骤(2)获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21，然后利用IPTG进行诱导表达得到融合Cap蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种高效表达犬圆环病毒Cap蛋白，其特征在于步骤(1)所述的特异性引物对序列为：
d(1-26)capF：5’-GCG
d(1-26)capR：5’-CC
3.根据权利要求1所述的一种高效表达犬圆环病毒Cap蛋白，其特征在于步骤(2)将所述的步骤(1)Cap蛋白序列插入到pET-28a载体BamH I和Xho I。
4.根据权利要求1所述的一种高效表达犬圆环病毒Cap蛋白，其特征在于步骤(3)可以在37℃条件下利用IPTG可以实现快速表达。
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