[发明专利]用阳离子脂质体包裹负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.用阳离子脂质体包裹负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法；其特征是包括如下步骤：

(1)将钙黄绿素负载到介孔二氧化硅纳米颗粒中；

(2)制备粒径均一的阳离子脂质体；

(3)将阳离子脂质体包裹到负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒外。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是步骤(1)制备方法是：将钙黄绿素与介孔二氧化硅纳米颗粒溶液混合均匀，避光磁力搅拌6～12小时，离心收集，沉淀用双蒸水重悬，得到负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒。

3.如权利要求2所述的方法，其特征是用去离子水将钙黄绿素配置成浓度250～300微摩尔的溶液，加入质量比1:10～5介孔二氧化硅纳米颗粒，混合均匀。

4.如权利要求2所述的方法，其特征是避光磁力搅拌速度是300～400转/分钟磁力搅拌6～12小时，10000～15000转/分钟离心10～15分钟，离心收集，沉淀用双蒸水重悬定量至1～5毫克每毫升，得到负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒。

5.如权利要求1所述的方法，其特征是步骤(2)制备方法是：称取(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺并加入三氯甲烷溶解；去除溶剂后，向反应器中加入质量分数50％的磷酸盐缓冲液，超声30～40分钟，得到云雾状白色液体，为悬浮在磷酸盐缓冲液中的粒径不等的阳离子脂质体；将以上溶液用孔径100纳米的滤膜过滤，得到的澄清稳定液体即为粒径均一的阳离子脂质体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征是称取(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺加入三氯甲烷配制成浓度为2～10毫克每毫升的溶液溶解；将旋转蒸发仪的水浴锅温度设置至36～42℃，打开真空泵抽真空30～40分钟后，在反应器形成一层乳白色覆盖物，再加入质量分数50％的磷酸盐缓冲液体。

7.如权利要求5所述的方法，其特征是得到云雾状白色液体用孔径为孔径100纳米的滤膜在15000～20000转/分钟下离心20～40分钟，重复5～10次，得到的澄清稳定液体即为粒径均一的阳离子脂质体。

8.如权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)制备方法是：将粒径均一的阳离子脂质体及负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒按照体积比1:2～4的比例混合，超声3～5分钟后，离心去上清，沉淀用等体积磷酸盐溶液重悬，得到阳离子脂质体包裹负载钙黄绿素的可对活细胞进行标记的介孔二氧化硅纳米颗粒。

9.如权利要求8所述的方法，其特征是超声后15000～20000转/分钟离心5～10分钟去上清，重复1～2遍，沉淀用等体积磷酸盐溶液重悬。

10.如权利要求1方法制备的阳离子脂质体包裹负载钙黄绿素的介孔二氧化硅纳米颗粒，粒径在80～130纳米。