[发明专利]一株联产壳聚糖酶和γ-聚谷氨酸的菌株及其应用

权利要求书

1.一株产壳聚糖酶和γ-聚谷氨酸的菌株LZ303，其特征在于所述菌株LZ303，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏日期为2017年12月21日，分类命名为沙福芽孢杆菌，保藏编号为：CGMCC No. 15111，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.一种利用权利要求1所述菌株LZ303生产壳聚糖酶的方法，其特征在于它的步骤如下：

（1）菌株活化：挑取菌株LZ303的菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱28～30℃培养14～20h；

（2）液体种子制备：挑取步骤（1）活化的菌株接种于装有液体种子培养基的容器中，纱布封口，于26-37℃，150～200r/min摇床振荡培养18～24h，得液体种子；

（3）液体发酵：按体积比5～20%接种量向发酵培养基接入步骤（2）制备的液体种子，转速300～650r/min，溶氧控制10～30%，pH6.0～7.0，温度26～37℃，通气培养24～48h，得到壳聚糖酶发酵液；所述的发酵培养基的成分及终浓度：胶体壳聚糖10～20 g/L、酵母浸粉5～15 g/L、MgSO₄ 0.1～0.5 g/L、NaCl 1～2.5 g/L、KH₂PO₄ 1～2 g/L、CaCl₂ 0.1～0.5 g/L，pH 6.5，115℃高压蒸汽灭菌20min。

3.根据权利要求2所述生产壳聚糖酶的方法，其特征在于所述的固体斜面培养基的成分及终浓度：蔗糖 2 g/L，酵母浸粉 5 g/L，蛋白胨 5 g/L，胰蛋白胨 5 g/L，NaCl 5 g/L，琼脂 18 g/L，pH 7.0，121℃高压蒸汽灭菌20 min。

4.根据权利要求2所述生产壳聚糖酶的方法，其特征在于所述的液体种子培养基的成分及终浓度：蔗糖 1～5 g/L，酵母浸粉1～10 g/L，蛋白胨1～10 g/L，胰蛋白胨 1～10 g/L，KH₂PO₄ 1～2 g/L，NaCl 1～5 g/L， pH 7.0，115℃高压蒸汽灭菌20 min。

5.一种利用权利要求1所述菌株LZ303生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于它的步骤如下：

（1）菌株活化：挑取菌株LZ303的菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱28～30℃培养14～20h；

（2）液体种子制备：挑取步骤（1）活化的菌株接种于装有液体种子培养基的容器中，纱布封口，于26～37℃，150～200r/min摇床振荡培养18～24h，得液体种子；

（3）液体发酵：按体积比5～20%接种量向发酵培养基接入步骤（2）制备的液体种子，转速300～650r/min，溶氧控制20～50%，pH6.0～7.5，温度26～37℃，通气培养24～48h，得到γ-聚谷氨酸的发酵液；所述的发酵培养基的成分及终浓度：蔗糖 10～30 g/L，甘油 5～20g/L，L-谷氨酸 10～30 g/L，D-谷氨酸0～5 g/L，CaCL₂ 0.5～2 g/L，KH₂PO₄ 1～5 g/L，MgSO₄ 0.5～1 g/L， 酵母粉 5～20 g/L， 丁二酸 1～3 g/L， (NH₄)₂SO₄ 2～5 g/L，MnSO₄10～20mg/L， FeSO₄20～40mg/L，pH 6.5，115℃高压蒸汽灭菌20min。

6.根据权利要求5所述生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于所述的固体斜面培养基的成分及终浓度：蔗糖 2 g/L，酵母浸粉 5 g/L，蛋白胨 5 g/L，胰蛋白胨 5 g/L，NaCl 5 g/L，琼脂 18 g/L，pH 7.0，121℃高压蒸汽灭菌20 min。