[发明专利]一种用保幼激素基因检测昆虫产卵量的应用及方法在审
申请号: | 201810035757.2 | 申请日: | 2018-01-15 |
公开(公告)号: | CN108251535A | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 王娟;王孟卿;刘晨曦;张礼生;郭义;唐艺婷;陈红印 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C07K14/435;C12N15/12 |
代理公司: | 北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 11003 | 代理人: | 王长禄 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 保幼激素 昆虫 产卵量 昆虫种群 草蛉成虫 基因检测 检测 氨基酸序列 核苷酸编码 食物营养源 氨基酸序 核苷酸序 基因编码 表达量 基因 取食 蛋白质 种群 评估 应用 | ||
1.检测保幼激素基因表达量在评估昆虫产卵量中的应用;所述保幼激素基因的核苷酸序列为序列表中的序列1。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述昆虫包括昆虫个体或昆虫种群;所述昆虫种群为取食不同食物的昆虫种群;所述保幼激素基因编码的蛋白质的氨基酸序列为序列表中序列2,或序列表中序列1自5’末端第52-645位核苷酸编码的215个氨基酸序列;所述昆虫具体为大草蛉成虫。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述用于检测保幼激素编码基因的表达量的物质为如下1)-3)中任意一种:
1)引物对A由引物1和引物2组成;所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;
2)含有所述引物对A的qRT-PCR反应体系;
3)含有所述引物对A或所述qRT-PCR反应体系包含的所有试剂及试剂盒。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系由qRT-PCR扩增缓冲液Mix体系、dNTP、cDNA、由所述引物1作为的上游引物、由所述引物2作为的下游引物、去离子水、荧光染料组成;
所述上游引物、所述下游引物在上述qRT-PCR反应体系中的终浓度均为8-10μM。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系还包括内参引物对B;所述内参引物对B由引物3和引物4组成;所述引物3的核苷酸序列为序列表中序列6;所述引物4核苷酸序列为序列表中序列7。
6.一种用于检测保幼激素编码基因的表达量的qRT-PCR反应体系,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系由引物对A、qRT-PCR扩增缓冲液Mix体系、dNTP、cDNA、去离子水、荧光染料组成;
所述引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;
所述引物1作为该反应体系的上游引物、所述引物2作为该反应体系的下游引物,所述上游引物、所述下游引物在上述qRT-PCR反应体系中的终浓度均为8-10μM。
7.根据权利要求6所述的用于检测保幼激素编码基因的表达量的qRT-PCR反应体系,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系还包括内参引物对B;所述内参引物对B由引物3和引物4组成;所述引物3的核苷酸序列为序列表中序列6;所述引物4核苷酸序列为序列表中序列7。
8.一种用于检测保幼激素编码基因的表达量的试剂盒,其特征在于:包括引物对A或包含qRT-PCR反应体系所有试剂。
9.一种用保幼激素基因检测昆虫产卵量的方法,其特征在于:包括如下步骤:
第一步,用引物对A或qRT-PCR反应体系或试剂盒对待测的昆虫进行qRT-PCR扩增;
第二步,对比所述待测昆虫的保幼激素基因的表达量;
上述方法中所述昆虫一般为昆虫个体或昆虫种群;
所述试剂盒含有所述引物对A或所述qRT-PCR反应体系包含的所有试剂。
10.一种蛋白或其编码基因,其特征在于:
所述编码蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列2;
所述编码蛋白的核苷酸序列为序列表中序列1。
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