[发明专利]一种生物有机肥发酵菌剂有效
申请号: | 201810037518.0 | 申请日: | 2018-01-16 |
公开(公告)号: | CN108130295B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 吕沐永;赵德征;任怡静;赵令群 | 申请(专利权)人: | 柳州市宏华生物肥有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/14;C05F11/08;C12R1/07;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/645 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 周晟;陈红 |
地址: | 545005 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 有机肥 发酵 | ||
1.一种生物有机肥发酵菌剂,其特征在于,其活性成分包括以下菌种:保藏编号为CICC.NO.10888的解淀粉芽孢杆菌K1、保藏编号为CICC.NO.10073的枯草芽孢杆菌D1、保藏编号为CICC.NO.10090的枯草芽孢杆菌D2、保藏编号为CICC.NO.10037的地衣芽孢杆菌S1、保藏编号为CICC.NO.10092的地衣芽孢杆菌S2、保藏编号为ACCC.NO.30346的嗜热侧孢霉T1;
每种菌种单独培养,获得各自的种子菌剂,然后将各种子菌剂混合后进行扩繁培养获得最终的生物有机肥发酵菌剂;
所述的种子菌剂的制备方法为:
1)将解淀粉芽孢杆菌K1接种于用蛋白胨、牛肉浸取物、NaCl、琼脂、蒸馏水配置出的pH为7.0的培养基I中,在35-40℃下,摇床震荡培养1-3天,震荡速度为100-200rpm,得到解淀粉芽孢杆菌种子菌剂N1;
2)将枯草芽孢芽孢杆菌D1接种于用NaCl、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水配置出的pH为7.2的培养基II中,在28-32℃下,摇床震荡培养10-15小时,震荡速度为120-180rpm,得到枯草芽孢杆菌种子菌剂N2;
3)将枯草芽孢芽孢杆菌D2接种于用NaCl、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水配置出的pH为7.2的培养基II中,在28-32℃下,摇床震荡培养10-15小时,震荡速度为120-180rpm,得到枯草芽孢杆菌种子菌剂N3;
4)将地衣芽孢杆菌S1接种于用NaCl、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水配置出的pH为7.2的培养基III中,在28-32℃下,摇床震荡培养20-28小时,震荡速度为100-300rpm,得到地衣芽孢杆菌种子菌剂N4;
5)地衣芽孢杆菌S2接种于用NaCl、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水配置出的pH为7.2的培养基III中,在28-32℃下,摇床震荡培养20-28小时,震荡速度为100-300rpm,得到地衣芽孢杆菌种子菌剂N5;
6)将嗜热侧孢霉T1接种于用马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水配置出的培养基IV中,在42-48℃下,摇床震荡培养70-75小时,震荡速度为100-300rpm,得到嗜热侧孢霉种子菌剂N6;
所述的扩繁培养包括以下步骤:
a、将解淀粉芽孢杆菌种子菌剂N1、枯草芽孢杆菌种子菌剂N2、枯草芽孢杆菌种子菌剂N3、地衣芽孢杆菌种子菌剂N4、地衣芽孢杆菌种子菌剂N5按照重量比0.5-1.5:1-3:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5的比例混合均匀得混合物N;
在发酵罐中加入用葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、碳酸钙、蒸馏水制成的pH为7.0的培养基V,灭菌,加入相当于发酵罐培养基体积的5-10%的混合物N作种子进行扩繁培养,得到培养物Y1;
b、在发酵罐中加入用葡萄糖、麦芽粉、蛋白胨、酵母膏、硫酸铵、二水氯化钙、蒸馏水配置成的pH为7.0的培养基VI,灭菌,加入相当于发酵罐培养基体积4-8%的嗜热侧孢霉种子菌剂N6作种子进行扩繁培养,得到培养物Y2;
c、将Y1、Y2按照体积比为5-10:0.5-1.5混合均匀后,经膜滤浓缩5-10倍,加入分散剂,进一步干燥得到固体产品,即得;
所述的培养基I中各原料的重量份配比为:蛋白胨3-7、牛肉浸取物2-5、NaCl 3-7、琼脂10-20、蒸馏水800-1200;
所述的培养基II中各原料的重量份配比为:NaCl 3-7、牛肉膏8-12、蛋白胨8-12、琼脂18-22、蒸馏水800-1200;
所述的培养基III中各原料的重量份配比为:NaCl 3-7、牛肉膏8-12、蛋白胨8-12、琼脂15-25、蒸馏水800-1200;
所述的培养基IV中各原料的重量份配比为:马铃薯100-300、葡萄糖10-30、琼脂15-20、蒸馏水800-1200;
所述的培养基V中各原料的重量份配比为:葡萄糖10-15、蔗糖5-10、蛋白胨2-7、酵母膏3-7、磷酸二氢钾1-3、碳酸钙1-3、蒸馏水800-1200;
所述的培养基VI中各原料的重量份配比为:葡萄糖10-15、麦芽粉5-10、蛋白胨2-7、酵母膏3-7、硫酸铵1-3、二水氯化钙1-3、蒸馏水800-1200;
所述的混合物N的扩繁培养条件为:罐压0.4-0.6MPa,罐温30-35℃,空气流量为0.2-0.5v/v/min,搅拌器转速为100-200rpm,扩繁培养18-24小时,当培养液的OD值为OD600nm下降0.02时终止发酵;
所述的嗜热侧孢霉种子菌剂N6的扩繁培养条件为:罐压0.5-1MPa,罐温43-47℃,空气流量为0.5-1.0v/v/min,搅拌器转速为150-200rpm,扩繁培养70-75小时,当培养液的OD值为OD600nm下降0.02时终止发酵。
2.根据权利要求1所述的生物有机肥发酵菌,其特征在于:所述的步骤c中分散剂由沸石粉、玉米粉按1-2:1-2的重量比配制而成。
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