[发明专利]一种提高肝素抗凝血活性的方法在审
申请号: | 201810039595.X | 申请日: | 2018-01-16 |
公开(公告)号: | CN108220365A | 公开(公告)日: | 2018-06-29 |
发明(设计)人: | 陈荫 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12P19/26 | 分类号: | C12P19/26 |
代理公司: | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人: | 翁霁明 |
地址: | 316022 浙江省舟*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 硫酸基 肝素 供体 肝素抗凝血 对硝基苯酚 抗凝血活性 抗血栓活性 硫酸化修饰 生物合成酶 微生物发酵 选择性修饰 磺酸钾盐 磷酸硫酸 凝血活性 酶修饰 转移酶 磷酸 底物 高抗 腺苷 修饰 | ||
1.一种提高肝素抗凝血活性的方法,其特征在于该方法是以现有肝素为底物,采用PAPS(3’-磷酸腺苷-5’-磷酸硫酸)为硫酸基供体,以肝素生物合成酶3-O-硫酸基转移酶(3-OST)对其进行修饰,得到高抗凝血活性的肝素。
2.根据权利要求1所述的提高肝素抗凝血活性的方法,其特征在于所述硫酸基供体的PAPS由微生物发酵产生,或使用极为廉价的PNPS(对硝基苯酚磺酸钾盐)作为酶修饰反应的硫酸基供体。
3.根据权利要求1或2所述的提高肝素抗凝血活性的方法,其特征在于所述的肝素选用1g猪小肠肝素、2MPAPS、0.1g 3-OST溶于1L MES缓冲液50mM中,35—40℃反应10—15h,95—100℃水浴加热10—20min,离心取上清,上清浓缩至90—110mL,3500kDa透析袋对蒸馏水透析1.5-2.5天,冷冻干燥后即得反应后产物。
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