[发明专利]一种重组亚单位禽流感疫苗Sef4M2e

说明书

本发明属于生物技术领域，具体为一种重组亚单位禽流感疫苗。本发明的重组亚单位禽流感疫苗，由4种禽流感病毒高度保守的基质蛋白2胞外区M2e1、M2e2、M2e3和M2e4相串联组合后重组于肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白C端而构成，记为Sef4M2e；组成形式为Sef‑Lp‑M2ea‑Lp‑M2eb‑Lp‑M2ec‑Lp‑M2ed；M2ea、M2eb、M2ec和M2ed分别为M2e1、M2e2、M2e3和M2e4中的任意一个，而且互不相同，共有16种组合；Sef为肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白；Lp为若干个不固定氨基酸残基构成的连接肽。M2e1、M2e2、M2e3、M2e4和Sef4M2e氨基酸序列如SEQ ID No.1~SEQ ID No.5所示。Sef4M2e可作为禽流感疫苗用于接种人或鸡、鸭、鹅、鸽子和鹌鹑等家禽。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种重组亚单位禽流感疫苗及其应用。

背景技术

甲型流感病毒是负链RNA病毒，基因组为八个编码片段，编码十四个蛋白，其中血凝素（ hemagglutinin，HA ）、神经氨酸酶（neuraminidase ，NA）和基质蛋白2（matrixprotein 2，M2）为膜蛋白；根据HA 和NA的不同，分为18 个HA 亚型和11 个NA亚型（ Wu Y,et al. Bat-derived influenza-like viruses H17N10 and H18N11.Trends Microbiol.2014 ,22(4):183-91）。甲型流感病毒通过HA和宿主细胞表面的唾液酸受体结合进入候鸟、家禽、猪和人等宿主；由于不同种属唾液酸受体的结构不同等原因，甲型流感病毒存在种属特异性，难以跨种属传播，因而有禽流感病毒、猪流感病毒和人流感病毒之分（Kim K, etal. Host-Specific and Segment-Specific Evolutionary Dynamics of Avian andHuman Influenza A Viruses: A Systematic Review. PLoS One. 2016; 11(1):e0147021.）。候鸟携带的禽流感病毒感染家禽，和潜伏于家禽体内的禽流感病毒发生不同亚型间的基因重组，产生致病性的新亚型，是导致家禽和人禽流感爆发的原因，例如1997年发生在香港的H5N1（Subbarao K, et al. Characterization of an avian influenza A(H5N1) virus isolated from a child with a fatal respiratory illness. Science.1998,279(5349):393-6），2003年发生在荷兰H7N7 （Update: influenza activity--United States and worldwide, 2002-03 season, and composition of the 2003-04influenza vaccine.Centers for Disease Control and Prevention (CDC).MMWR MorbMortal Wkly Rep. 2003 Jun 6; 52(22):516-21），2013年发生在 中国的H7N9 （Gao R,et al.Human infection with a novel avian-origin influenza A (H7N9) virus. NEngl J Med. 2013， 368(20):1888-97）和 H10N8（Chen H, et al. Clinical andepidemiological characteristics of a fatal case of avian influenza A H10N8virus infection: a descriptive study. Lancet. 2014，383(9918):714-21），2009年爆发的H1N1则是由于人、禽和猪甲型流感病毒在猪中发生基因重排以及编码HA和NA的HA和NA基因发生突变的结果（Novel Swine-Origin Influenza A (H1N1) Virus InvestigationTeam, Dawood FS, et al. Emergence of a novel swine-origin influenza A (H1N1)virus in humans. N Engl J Med. 2009 ,360(25):2605-15）。除了H5N1、H7N7、H7N9 和H10N8以外，迄今已报道能感染人的禽流感病毒还有H5N6（高敏等.人感染高致病性H5N6禽流感病毒的分子生物学特征.临床检验杂志，2016，34(2),156-9）、H6N1（Shi W, et al.Origin and molecular characterization of the human-infecting H6N1 influenzavirus in Taiwan. Protein Cell. 2013 , 4(11):846-53）、H10N7（Wu H, et al. Novelreassortant H10N7 avian influenza viruses isolated from chickens in EasternChina. J Clin Virol. 2015 ，65:58-61）和H7N2与H7N3以及H9N2（Wong SS, et al.Avian influenza virus infections in humans. Chest 2006，129:156-68）等。禽流感病毒是家禽和人类爆发禽流感的元凶，给家禽养殖业和人类健康造成了极大危害。