[发明专利]利拉利汀的高效液相色谱检测方法

说明书

本发明提供一种利拉利汀的高效液相色谱检测方法及定量检测方法，其色谱条件如下：色谱柱采用反相C18色谱柱；流动相包括流动相A和流动相B；流动相A为甲酸‑醋酸铵的水溶液，水溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.05％，水溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM；流动相B为甲酸‑醋酸铵的乙腈，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.05％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM；采用梯度洗脱。本发明的方法，具有操作简单、分离效果好且精密度和准确度高的特点，能实现对利拉利汀及其有关物质的良好分离，呈良好的线性关系，并且重现性高，可用于精准测定利拉利汀的含量，同时用于其原料及制剂的质量优化和有关物质检测，有助于其后期的原料优化、药代动力学定量考察以及制剂质量研究。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种利拉利汀的高效液相检测方法。

背景技术

糖尿病是一种常见的慢性病，据国际糖尿病联合会(IDF)预测，2011年全世界糖尿病患病率约为8.3％(约3.66亿患者)，预计到2030年，糖尿病患病人数将升至5.52亿，其中以2型糖尿病最为常见。

利拉利汀(Linagliptin)，是德国勃林格殷格翰制药公司开发的口服降糖药物，于2011年5 月2日经美国FDA批准上市，商品名为Tradjenta。本品为片剂，与饮食和锻炼结合用于改善2 型糖尿病患者的血糖控制能力。利拉利汀即可单独单独服用，也可与其它现有药物联合使用，如与二甲双胍(metformin)，格列美脲(glimepiride)和吡格列酮(pioglitazone)等合用。目前尚未有利拉利汀与胰岛素联合使用的研究报道。利拉利汀不能用于1型糖尿病患者或血中 /尿中酮体升高(糖尿病酮酸症)的患者。在约3800名2型糖尿病患者参与的8项双盲临床试验中，利拉利汀的安全性和有效性得到证实。其主要不良反应包括：上呼吸道感染、流鼻涕、喉咙痛、肌肉疼和头痛等[Bochringre IngelheimIntemational GMBH&Co.KG.Phar-maceuti cal compasition,pharmaceutical dosageform,process for their preparation and uses thereof: US,2010/0209506AI[P].2010-02-11.]。

虽然利拉利汀已经被美国FDA批准上市，但是它还是有一些不良反应，从而在服药时需要降低剂量以限制毒性进一步提高患者的耐受性，使靶向投药达到最大，这必然要求利拉利汀检测方法的定量检测限相对较低。

本发明针对现有技术中高效液相定量手段进行了改进与优化，与现有技术中的方法相比，本发明的检测方法用于检测利拉利汀不仅分离效果好，精密度和准确度高，而且操作安全简易，处理方便快捷，适合高通量筛选及精准定量。该方法对利拉利汀的原料、制剂质量研究以及相关药动学定量研究等方面均具有重要研究价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种利拉利汀的高效液相色谱检测方法，其用于利拉利汀的含量检测具有定量检测限低、线性关系好、重复性好的特点。

为解决上述技术问题，本发明提供一种利拉利汀的高效液相色谱检测方法，色谱条件如下：

色谱柱采用反相C18色谱柱；

流动相包括流动相A和流动相B；流动相A为甲酸-醋酸铵的水溶液，该水溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.05％，水溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM；流动相B为甲酸-醋酸铵的乙腈溶液，该乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.05％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM；

采用梯度洗脱：流动相A+流动相B＝100％；0-0.01min，流动相B保持体积百分比为10％； 0.01-2.10min,流动相B体积百分比由10％递增至80％；2.10-2.11min，流动相B体积百分比由80％递减至10％；2.11-3.00min，流动相B保持体积百分比为10％。