[发明专利]用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的DPO引物组及其应用

权利要求书

1.用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒同时检测的DPO引物组，其特征在于由分别用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的三对DPO引物对组成；

其中，用于猪流行性腹泻病毒检测的DPO引物对如下所示：

PEDV-DPO-F：GGTATTGGAGAAAATCCTGACAGGIIIIIGCAACAGCA

PEDV-DPO-R：GACGCATCAACACCTTTTTCGIIIIITTCCGCATC

其中，用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物对如下所示：

TGEV-DPO-F：CTGTTCTTGCCGCACTTAAAAIIIIIGGTGTTGAC

TGEV-DPO-R：TAGCTCCATAAAATCTTGTCACATCIIIIITACCTGCAG

其中，用于猪轮状病毒检测的DPO引物对如下所示：

PRoV-DPO-F：TGTTTTTAACAAAAGGATIIIIIACAGGGTCA

PRoV-DPO-R：CTGTAGTCGAACATCCTAIIIIIAGAGTCTGC

其中，I表示次黄嘌呤核苷。

2.权利要求1所述的DPO引物组在制备同时检测或诊断猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的试剂中的用途。

3.一种用于同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的多重DPO-real time RT-PCR试剂盒，其特征在于含有权利要求1所述的引物组。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括荧光染料、反应缓冲液、dNTP、RNasin、随机引物、反转录酶、阳性标准品、阴性对照以及无RNA酶水。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的反转录酶为M-MLV，所述的阳性标准品为分别含有TGEV N基因的第32-212位序列、PEDV N基因的第776-992位序列以及PRoVVP7基因的第25-311位序列的质粒，其中TGEV N基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示、PEDV N基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示、PRoV VP7 基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.7所示。