[发明专利]一种以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法

权利要求书

1.一种以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法，其特征在于：

(1)聚乙烯亚胺PEI稳定的纳米铂粒子的制备：按1mL去离子水中加入0.5～1.0mg PEI，将PEI加入去离子水中，再加入1mol/L的盐酸调至pH＝4,按PEI与四氯铂酸钾的摩尔比1：25～150的比例，将四氯铂酸钾加入PEI水溶液，然后在20℃，转速500转/分钟的金属浴中孵育15～25min；再按PEI与硼氢化钠的摩尔比1：125～750的比例，将硼氢化钠溶于0.3mol/L的氢氧化钠水溶液中配成1mg/mL溶液，将硼氢化钠溶液加入到上述孵育好的溶液中，在上述同样的金属浴条件下孵育10～15min；然后再按盐酸与氢氧化钠的摩尔比1：1的比例，将1mol/L的盐酸加入到再次孵育好的溶液中，调节溶液的pH至中性，溶液变色，最后在金属浴孵育2～3h，制得聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子，即PEI-Pt_n，n代表平均每一个PEI分子中稳定的铂原子数；

(2)葡萄糖检测：按葡萄糖氧化酶与葡萄糖的摩尔比1：12～120的比例，将葡萄糖氧化酶(GOx)分别与浓度为0.1～1.0mmol/L葡萄糖溶液混合，在50℃下反应30min，反应产生过氧化氢(H₂O₂)；另取离心管，配置浓度为4～10μmol/L的PEI-Pt_n溶液和6mmol/L的3,3^’,5,5^’-四甲基联苯胺(TMB)溶液，按PEI-Pt_n:TMB的摩尔比为1：450～180的比例，将PEI-Pt_n、TMB加入到400μL，0.2mol/L，pH＝4.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液，30℃下反应10min； 将上述的PEI-Pt_n、TMB和醋酸-醋酸钠混合缓冲溶液作为显色剂，分别加入到每个葡萄糖溶液中，30℃下反应20min，显色产物溶液颜色为蓝色，随葡萄糖浓度增大颜色变深，用紫外可见分光光度计在652nm下测量吸光度，并以吸光度为纵坐标，葡萄糖的浓度作为横坐标，绘制标准曲线并得出标准曲线方程，吸光度增大的程度与葡萄糖浓度在0.1～1.0mmol/L为线性关系。

2.根据权利要求1所述的以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法，其特征在于：所述聚乙烯亚胺的分子量为70000。