[发明专利]一种发酵制备达托霉素的方法

权利要求书

1.一种发酵法制备达托霉素的方法，其特征在于整个发酵过程中流加碳源，发酵至18～30h时，开始以第一速率流加癸酸前体化合物，发酵至28～40h时，将癸酸前体化合物的流速调节至第二速率，直至发酵结束。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的癸酸前体化合物选自癸酸、癸酸盐，其中癸酸盐选自癸酸钠、癸酸钾、癸酸铵，优选癸酸或癸酸钠。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的癸酸与耦合剂耦合，所述耦合剂选自油酸甲酯、乙醇、氨水，优选油酸甲酯。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述癸酸与耦合剂的比例为1:0.5～2.5，优选1:1。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的癸酸盐以溶液形式流加，癸酸盐溶液浓度为5％～15％w/v，优选8％～12％w/v，最优选10％w/v。

6.据权利要求4所述的方法，其特征在于所述癸酸-耦合剂的第一速率为0.05～0.20mL/L/h，优选0.10～0.14mL/L/h，最优选0.12mL/L/h，所述癸酸-耦合剂的第二速率为0.15～0.30mL/L/h，优选0.22～0.26mL/L/h，最优选0.24mL/L/h。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述癸酸盐溶液的第一速率为0.01～0.15g/L/h，优选0.03～0.10g/L/h，最优选0.06g/L/h；所述癸酸盐溶液第二速率为0.05～0.20mL/L/h，优选0.10～0.14mL/L/h，最优选0.12g/L/h。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述碳源选自葡萄糖、乳糖、糖蜜、麦芽糊精、淀粉、山梨醇的一种或几种，优选葡萄糖。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述碳源的浓度为30％～70％w/v，优选40％～60％w/v，优选50％w/v。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于所述碳源的流加速率分第一速率与第二速率，其中第一速率为0.20～0.45mL/L/h，优选0.30～0.38mL/L/h，最优选0.34mL/L/h。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于碳源在23～35h之后调至第二速率流加，第二速率为0.30～0.60mL/L/h，优选0.39～0.47mL/L/h，最优选0.43mL/L/h。

12.根据权利要求8所述的方法，还包含以下步骤：1)将菌种接种于一级培养基中，培养得一级种子液；2)将一级种子液接种至二级种子培养基，培养得二级种子液；3)将二级种子液接种至发酵培养基。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于发酵培养基的培养时间为96～192h，优选120～168h，最优选144h。

14.根据权利要求12所述的方法，还包括pH调节的步骤，优选发酵至14～22h时，将pH控制在6.0～7.0直至发酵结束，最优选的pH调节时间为自发酵开始16～20h，最优选的pH范围为6.4～6.6。

15.根据权利要求1-14任一项所述的方法，其特征在于所述发酵培养基含有碳源、氮源、无机盐，所述碳源为选自葡萄糖、乳糖、糖蜜、麦芽糊精、淀粉、山梨醇中的一种或几种；所述的氮源为选自酵母粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、玉米蛋白粉、氨盐中的一种或几种；所述的无机盐为选自Na盐、K盐、Ca盐、Mg盐、Fe盐、Mn盐、Zn盐、Co盐或Ni盐的一种或几种。