[发明专利]一种黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因及其应用有效
| 申请号： | 201810058725.4 | 申请日： | 2018-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN108300724B | 公开（公告）日： | 2022-05-10 |
| 发明（设计）人： | 韩芳;宋青;王小龙;白泽清;倪栋;徐晓琴;侯人华;江小剑;童跃聪;陈剑;刘燕頔;徐晖 | 申请（专利权）人： | 厦门市产品质量监督检验院;集美大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;姜谧 |
| 地址： | 361000 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 黄姑鱼 超氧化物歧化酶 eccu znsod 基因 及其 应用 | ||
1.黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因在亚硝态氮对黄姑鱼的污染检测中的应用，其特征在于：该黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因cDNA如SEQ ID NO 01所示；该cDNA以黄姑鱼肝脏组织总cDNA为模板，以正向引物F1和反向引物R1为扩增引物对，通过PCR反应获得，其中，F1包括SEQ ID NO 02所示的序列，R1包括如SEQ ID NO 03所示的序列。
2.一种亚硝态氮污染PCR检测试剂盒，其特征在于：基于实时荧光定量PCR，以黄姑鱼组织中的黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因为检测对象，包括检测引物对和内参引物对，其中，检测引物对包括正向引物F2和反向引物R2，内参引物对包括用于检测黄姑鱼管家基因β-actin的正向引物F3和反向引物R3；
正向引物F2和反向引物R2分别如SEQ ID NO 04和05所示；
正向引物F3和反向引物R3分别如SEQ ID NO 06和07所示；
该黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因cDNA如SEQ ID NO 01所示。
3.如权利要求2所述的一种亚硝态氮污染PCR检测试剂盒，其特征在于：所述黄姑鱼组织为黄姑鱼的肝脏组织、鳃组织和头肾组织。
4.一种权利要求2或3所述的亚硝态氮污染PCR检测试剂盒的使用方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）取不同的黄姑鱼组织，提取相应的总RNA，然后反转录得到相应的cDNA，以此为模板，通过实时荧光定量PCR扩增所述黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因；
（2）采用2–ΔΔCt法对上述黄姑鱼超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因的mRNA的时相差异表达进行分析。
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