[发明专利]一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置及方法

权利要求书

1.一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置，其特征在于，该装置包括三维平台、放置在三维平台上的样品池、激光检测单元及照明单元，所述样品池中放置待检测的血小板缓冲液及模拟纤维蛋白原，所述激光检测单元的光路中包括依次设置的激光光源、一号反射镜、扩束器、一号二向色镜、二号反射镜、物镜、样品池、聚光镜、二号二向色镜、一号透镜及四象限检测器，所述照明单元的光路中包括依次设置的照明光源、二号二向色镜、聚光镜、样品池、物镜、二号反射镜、一号二向色镜、二号透镜及CCD相机，检测时，来自于物镜的激光将选定的单个待测血小板夹持固定，通过CCD相机成像来观察样品池内颗粒的运动状态。

2.根据权利要求1所述的一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置，其特征在于，所述的样品池包括不锈钢支撑板以及粘结在不锈钢支撑板一侧的双层玻片，所述不锈钢支撑板的中部设有通孔，所述双层玻片包括两片相互粘结的玻片，在两块玻片之间且通孔对应的区域中，放置血小板缓冲液以及模拟纤维蛋白原。

3.根据权利要求2所述的一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置，其特征在于，所述的模拟纤维蛋白原为核壳结构，包括中部的二氧化硅微球以及表面的纤维蛋白原，所述模拟纤维蛋白原夹持在两块玻片之间，且其上下侧分别与两块玻片抵接，所述二氧化硅微球的直径为90～120μm。

4.根据权利要求2所述的一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置，其特征在于，所述的血小板缓冲液采用的缓冲液包括138mM的NaCl、12mM的NaHCO₃、2.9mM的KCl、5.5mM的葡萄糖、10mM的Hepes以及0.1％(wt)的BSA。

5.根据权利要求4所述的一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置，其特征在于，所述的血小板缓冲液中血小板的个数为小于等于10⁶个/mL。

6.根据权利要求1所述的一种用于测量人体单个血小板收缩力的装置，其特征在于，所述的激光为波长为800～1500nm的红外激光。

7.一种利用如权利要求1～6任一所述装置进行单个血小板收缩力测量方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在不锈钢支撑板上粘上双面胶，然后将一块玻片粘结在不锈钢支撑板上，并在玻片的另一侧的两条相对侧边上粘上双面胶，将模拟纤维蛋白原放置在该玻片表面，然后将另一块玻片覆盖并轻压，使模拟纤维蛋白原与两块玻片抵接，然后引入血小板缓冲液，用凡士林封口，得到样品池；

(2)将样品池放置在光镊样品台上，打开照明光源以及激光检测单元，利用来自于物镜的激光将选定的单个待测血小板夹持固定，通过CCD相机成像来观察样品池内模拟纤维蛋白原及待测血小板的运动状态，然后通过三维平台移动样品池，使得模拟纤维蛋白原靠近待测血小板，并通过三维平台记录模拟纤维蛋白原与待测血小板之间的距离；同时通过四象限检测器检测激光的动量变化；

(3)步骤(2)检测到的动量变化通过傅里叶变换和洛伦兹函数拟合之后，得功率谱密度图，从而得到光镊的相关光阱刚度k，根据F＝κΔx得到待测血小板与模拟纤维蛋白原之间的相互作用力，即得到单个血小板收缩力。

8.根据权利要求7所述的一种单个血小板收缩力测量方法，其特征在于，所述的功率谱密度图中，得到拐角频率f_c和扩散系数D^volt，然后根据公式得到光阱刚度k，其中，k_B为玻尔兹曼常数，T是温度。