[发明专利]一种从枸杞叶中提取黄酮的方法

说明书

本发明公开了一种从枸杞叶中提取枸杞黄酮的方法，鲜枸杞叶清洗、杀青、打浆除去木质素及粗纤维得枸杞叶浆，将酶解后的枸杞叶浆加入萃取系统，完成萃取的枸杞叶浆过滤、浓缩，加入70％的酒精，分离得清液，清液回收酒精后进一步分离提纯得黄酮。本发明得到枸杞黄酮外，还得到枸杞膳食纤维、枸杞蛋白粉、生物碱、叶绿素等其它枸杞功能性成分，提高枸杞叶的利用率，将原料做到吃干榨尽；本发明提取工艺节能、环保，得到的提取物纯度高、成本低。

技术领域：

本发明属于生物提取领域，具体地说是涉及一种从枸杞叶中提取黄酮的方法。

技术背景：

枸杞(Lycium)是茄科(Solanaceae)多年生落叶小灌木，在医药、食品领域中具有重要的应用价值。枸杞的传统药用部位是果实即枸杞子，具有悠久的开发利用历史。除果实外，叶片、嫩茎等也具有很高的医疗保健功效。枸杞叶含有大量的蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素、黄酮类化合物、生物碱、萜类化合物等多种营养成分和活性物质，具有广泛的生物学活性，在食品添加剂、配料以及功能性食品领域具有较大的开发潜力和广阔的市场前景。

枸杞的嫩茎叶统称枸杞叶，俗称天精草、地仙苗[1]。祖国医学认为，枸杞叶性凉、味甘、微苦，具有除烦益志、坚筋耐老、补虚益精、养肝明目、除热毒、散疮肿、补五劳七伤、去皮肤骨节间风等功效。现代医药学研究表明，枸杞叶含有丰富的营养成分和活性物质，具有降血压、降血脂、降血糖、预防心血管疾病、预防白内障、清除自由基、促进益生菌细胞生长、抗氧化、抗疲劳、抗癌、抗衰老、耐缺氧、抗微生物感染等功能。枸杞叶丰富的生物活性成分和独特的营养保健功能，使其在食品工业中具有广阔的开发应用前景。枸杞叶中的某些营养成分和活性物质有望成为良好的食品添加剂。

目前枸杞叶的深加工和开发应用尚十分有限，主要存在以下问题:a.以枸杞叶为原料的食品配料或添加剂寥寥无几；b.枸杞叶生物活性成分可开发、生产技术创新缓慢，规模较小。以枸杞叶为原料简单地、直接地做茶、做菜，虽然具有一定的经济效益，但是科技附加值较低，产品缺乏现代科学支撑和国际水准，很难深入发掘枸杞叶的药用价值和营养保健功效，经济、社会效益不够显著。

目前有关枸杞叶生物活性成分提取的报道较少，且全部处于实验室研究阶段。黄欣等以70％乙醇做溶剂，于65℃回流3次，每次2h，得到青海枸杞叶提取物。刘志勤等先将枸杞叶置70％乙醇中浸泡24h，然后超声波提取30min得到黄酮提取液。邹耀洪以丙酮为溶剂，回流提取2h，提取物经石油醚脱色后过聚乙烯吡咯烷酮柱吸附，用水洗去不吸附物，再用30％二甲基甲酰胺水溶液解吸得到洗脱液，制得枸杞叶黄酮类化合物。Terauchi等用含有0.1％KOH的95％甲醇回流提取3h得到含有枸杞甙I、II、III的提取液。Yeh等采用浸提法和微波提取法得到枸杞叶提取液。

枸杞叶中的5种黄酮类化合物,分别为5,7,3-三羟基-6,4,5-三甲氧基黄酮、金合欢素(4-甲氧基-5,7-二羟基黄酮)、金合欢素-7-O-L-鼠李糖基(1％6)--D-葡萄糖苷、木犀草素(5,7,3，4-四羟基黄酮)和芦丁,其质量百分比含量依次为0.0695％、0.0674％、0.0525％、0.0421％和0.0487％；枸杞叶中芦丁的含量高于茎和根皮。进一步研究表明,这5种黄酮类化合物中木犀草素抗氧化活性较强,优于合成抗氧化剂3,5-二叔丁基-4-羟基甲基苯。

然而，现有的枸杞叶生物活性成分提取研究不能满足工业化生产需求，主要存在以下共性问题:a.未从工业化、大规模生产角度探讨提取工艺。现有的枸杞叶提取工艺大多数采用传统的回流提取或煮沸提取方法，提取时间较长，能耗较大，效率较低。

发明内容：

本发明的目的在于解决现有技术的不足，开发枸杞叶深加工的方法，提出一种高效、节能、环保、高纯度的从枸杞叶中提取枸杞黄酮的方法。

为实现上述目的，本发明提供一种从枸杞叶中提取黄酮的方法，所述方法包括以下步骤：