[发明专利]一种NT-3转染BMSCs纳米微球控释体的制备方法及其应用在审

专利信息
申请号: 201810065488.4 申请日: 2018-01-23
公开(公告)号: CN108042497A 公开(公告)日: 2018-05-18
发明(设计)人: 董玉珍;宗海斌;刘中何;路坦;李爱国;赵斌;安永博 申请(专利权)人: 董玉珍
主分类号: A61K9/16 分类号: A61K9/16;A61K47/36;A61K38/18;A61P25/00;A61P19/08
代理公司: 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 代理人: 向志杰
地址: 453003 河南*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 nt 转染 bmscs 纳米 控释 制备 方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种NT-3基因转染BMSCs纳米微球控释体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,

(1)将不同相对分子量的壳聚糖分别溶解于缓慢加热的1%乙酸溶液,待完全溶解后用NaOH调节pH值至5.0-6.5;

(2)将上述溶液通过PBS磷酸盐缓冲液稀释到壳聚糖浓度为0.02%(w/v),乙酸浓度为3-7mmoL/L;

(3)通过0.15-0.35μm的过滤器进行过滤,得到壳聚糖溶液备用;

(4)将浓度为90-120μg/ml的pEGFP-C1溶解于3-8mmoL/L的Na2SO4中;

(5)将传代培养的BMSCs加入到步骤(3)所得到的壳聚糖溶液中;将步骤(4)中得到的溶液与NT-3溶液混合后;然后将二者等体积分别加热至50-65℃后,再进行混合,涡旋30s后静止30min,即得NT-3基因转染的BMSCs纳米微球控释体。

2.根据权利要求1所述的NT-3基因转染的BMSCs纳米微球控释体的制备方法,其特征在于:步骤(1)中用NaOH调节pH值至5.5。

3.根据权利要求2所述的NT-3基因转染的BMSCs纳米微球控释体的制备方法,其特征在于:步骤(2)中乙酸浓度为5mmoL/L。

4.根据权利要求3所述的NT-3基因转染的BMSCs纳米微球控释体的制备方法,其特征在于:步骤(3)中将浓度为100μg/ml的pEGFP-C1溶解于5mmoL/L的Na2SO4中。

5.根据权利要求4所述的NT-3基因转染的BMSCs纳米微球控释体的制备方法,其特征在于:壳聚糖溶液和NT-3溶液的混合加热温度为55℃。

6.权利要求1-5中任一所述方法制备的NT-3基因转染BMSCs纳米微球控释体在治疗脊髓损伤药物中的应用。

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