[发明专利]miR-351基因的应用在审

专利信息
申请号: 201810068418.4 申请日: 2018-01-24
公开(公告)号: CN108359690A 公开(公告)日: 2018-08-03
发明(设计)人: 张沛;刘聪;蔡建明;高福;程赢;杨彦勇;刘虎;赵海男;杜继聪;东肃河 申请(专利权)人: 中国人民解放军第二军医大学
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/113;A01K67/027
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 赵青
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 应用 造血系统损伤 基因抑制剂 造血干细胞 电离辐射 调控机制 研究动物 制备造血干细胞 生物技术领域 辐射敏感性 动物模型 医药用途 治疗药物 基因 构建 制备 研究 疾病 治疗
【权利要求书】:

1.miR-351基因抑制剂或沉默剂在制备造血干细胞调控机制研究动物模型中的应用。

2.根据权利要求1所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂在制备造血干细胞调控机制研究动物模型中的应用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂为:MiR351-g51,其序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂在制备造血干细胞调控机制研究动物模型中的应用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂为:MiR351-g34,其序列如SEQ ID NO.8所示。

4.miR-351基因抑制剂或沉默剂在制备治疗电离辐射所致造血系统损伤药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂在制备治疗电离辐射所致造血系统损伤药物中的应用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂为:MiR351-g51,其序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根据权利要求4所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂在制备治疗电离辐射所致造血系统损伤药物中的应用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制剂或沉默剂为:MiR351-g34,其序列如SEQ ID NO.8所示。

7.一种造血干细胞调控机制研究动物模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

A)miR-351基因敲除Founder鼠的建立:

选取MiR351-g51和MiR351-g34体外转录成mRNA,与Cas9蛋白一起显微注射到小鼠受精卵中,获得发生期望突变的首建小鼠;所述的MiR351-g51,其序列如SEQ ID NO.1所示;所述的MiR351-g34,其序列如SEQ ID NO.8所示;

B)两周龄后,对出生的小鼠进行测序,对其进行基因型分析和鉴定;

C)miR-351基因敲除稳定遗传F1代小鼠的建立:

将雄性Founder小鼠与野生型雌性小鼠交配获得F1代杂合子小鼠,小鼠出生20天后PCR鉴定,若有阳性小鼠出生,则表示转基因已经整合到生殖细胞;

D)将F1代杂合子小鼠杂交获得F2代纯合子小鼠,即为小鼠动物模型。

8.一种采用如权利要求7所述的构建方法得到的造血干细胞调控机制研究动物模型在筛选治疗电离辐射所致造血系统损伤药物中的应用。

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