[发明专利]一种葡萄果实愈伤组织的诱导方法及其培养基

说明书

本发明公开了一种葡萄果实愈伤组织的诱导方法及其培养基。培养基的组成为：基础培养基+TDZ 0.8～1.2mg/L+IBA 0.3～0.5mg/L+糖18～22g/L+琼脂5～7g/L。诱导方法，其特征在于，包括：将葡萄果实消毒后去皮，取果肉块接种于诱导培养基上进行诱导培养直至愈伤形成。本发明成功建立了‘夏黑’葡萄果实愈伤组织的培养方法，果实愈伤组织诱导率达到100％，为‘夏黑’葡萄的分子生物学以及基因工程研究提供了一条新的途径，为葡萄基因工程研究和基因转化提供一种新的试验材料，同时也为葡萄果实愈伤的培养提供了参考和借鉴。

技术领域

本发明涉及植物生物技术领域，特别涉及葡萄果实果肉愈伤组织的培养方法。

背景技术

目前葡萄基因组的研究是葡萄科学研究中的热点，葡萄基因组研究的方向主要涉及植株抗性、果实品质果实生产特性等几个大的方面，其中葡萄重要经济性状尤其是与果实品质形成相关的分子机理研究也成为是葡萄基因组研究的重点问题之一。分子机理研究最终的落脚点还是在基因功能验证上，但是由于葡萄的转基因技术还不够成熟，基因转化效率极低，而且转基因周期长，耗时耗力。愈伤组织是一种良好的验证基因功能的材料，愈伤组织是指外植体在离体培养条件下，形成的一团无极性、能旺盛分裂的薄壁细胞团，在培养过程中，经过诱导分化可以发育成完整的再生植株。

目前对于愈伤组织的研究多集中研究叶片的愈伤组织，而对于葡萄而言，果实品质的研究是葡萄科研工作者的重点研究内容，生产优质高产的葡萄果实也是科研工作者的而终极目标。仅研究葡萄叶片愈伤组织是不能满足科研要求的，尤其是对于葡萄果实而言，必须研究果实本身才能够达到生产优质果实的目的。目前葡萄的研究中，对果实品质形成以及果实成熟发育的分子机理研究是一大热点，因此，培养葡萄果实果肉的愈伤组织是研究葡萄果实品质形成以及果实成熟发育分子机理的一条非常重要的途径。

本发明提供了一种葡萄果实愈伤组织的培养方法，为今后葡萄的分子生物学以及基因工程研究提供了一条新的途径，同时也为葡萄果实愈伤的培养提供了参考和借鉴。

发明内容

发明目的：为解决现有技术中的问题，本发明提供了一种葡萄果实愈伤组织的诱导方法及其培养基，实现了以葡萄果实作为外植体的组织培养。

技术方案：本发明所述的葡萄果实愈伤组织的诱导培养基，含有TDZ0.8～1.2mg/L+IBA0.3～0.5mg/L。

具体的，所述的葡萄果实愈伤组织的诱导培养基的组成为：基础培养基+TDZ+IBA+糖18～22g/L+琼脂5～7g/L。

其中，所述的糖为葡萄糖。

所述诱导培养基的ph为5.35～5.45。

TDZ的浓度进一步为1.0mg/L，IBA的浓度为0.4mg/L。