[发明专利]一种宽裂解谱绿脓杆菌噬菌体及其消毒应用

说明书

本发明属于生物工程领域，提供了一株具有环境消毒能力的噬菌体及其应用，该噬菌体单体为铜绿假单胞菌噬菌体，拉丁名P.aeruginosaphage，被命名为Lp14，对铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)具有广谱的杀菌能力，噬菌体Lp14保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心，保藏日期为2017年3月30日，保藏编号为CGMCC No.13791；该噬菌体对绿脓杆菌具有强烈的裂解作用，为工业化生产噬菌体及用于消毒杀菌提供了噬菌体来源；该噬菌体还可作为一种安全的生物消毒剂用于貂场环境消毒，从而减少水貂养殖中的绿脓杆菌引起的出血性肺炎的发生，该噬菌体可以用于工业生产，可由宿主菌绿脓杆菌特异性扩增，可作为生物消毒剂应用于貂场环境消毒。

技术领域

本发明属于生物工程领域，尤其涉及一株具有环境消毒能力的噬菌体及其用途。

背景技术

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)又称作绿脓杆菌，是引起水貂出血性肺炎的主要病原菌之一，在自然界中分布十分广泛，可引起水貂、狐狸、鸡等的急性感染。

近年来随着我国水貂养殖业的快速发展，以及养殖规模的不断扩大，由铜绿假单胞菌引起的水貂出血性肺炎常呈地方性和季节流行性爆发，病死率甚至高达50％，给养殖业带来了极大的经济损失。随着抗生素耐药性的日益严重，由于铜绿假单胞菌引起的感染使用常规抗生素已经无法有效的治疗，尤其是对氨基糖苷类、氟喹诺酮类和β-内酰胺类的敏感性显著降低。

因此，迫切需要研发具有全新作用机制的抗菌产品。而噬菌体以其高效性、低成本、易获得、特异性强、不易产生耐药性等特点，在辅助或者替代抗生素及消毒药方面表现出巨大的发展潜力，已经受到了越来越多人的关注。

本发明提供了一株具有环境消毒能力的噬菌体及其用途，旨在控制水貂养殖场的出血性肺炎的发生。水貂出血性肺炎的主要病原为绿脓杆菌，该病的发生主要集中在每年的7-10月份，此时正值水貂换毛期，养殖场内脱落的水貂毛随风飞扬，挂在貂笼上，粘在地面或粪便上。绿脓杆菌是环境中的常在菌，尤其在动物毛发上有大量的附着。水貂养殖场很少进行喷洒消毒，且常规的消毒药不能有效杀灭绿脓杆菌，还具有刺激性、腐蚀性等副作用。国内的研究者做过水貂密闭环境下的消毒试验，但对水貂养殖场进行噬菌体的环境消毒以控制水貂出血性肺炎的发生尚未见报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种绿脓杆菌噬菌体，该噬菌体单体为绿脓杆菌噬菌体，拉丁名P.aeruginosaphage，被命名为Lp14，对铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)具有广谱的杀菌能力，噬菌体Lp14保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心，保藏地址：北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所；保藏日期为2017年3月30日，保藏编号为CGMCC No.13791；分类命名为绿脓杆菌噬菌体。噬菌体Lp14经双层平板法以17株水貂源绿脓杆菌为宿主菌，测定出噬菌体Lp14对17株宿主菌的裂解率为88.2％，说明该噬菌体是多价烈性噬菌体，在临床用于貂舍消毒具有很好的应用前景。

本发明一个方面提供了一种绿脓杆菌噬菌体，其保藏编号为CGMCC No.13791。

本发明另一个方面提供了本发明所述的绿脓杆菌噬菌体作为抑制绿脓杆菌的制剂中的用途。

本发明另一个方面提供了本发明所述的绿脓杆菌噬菌体在制备环境消毒制剂中的用途。优选地，在制备杀灭绿脓杆菌的环境消毒制剂中的用途，更优选为作为动物饲养、食品、药品、医疗器械制备工厂、医院、以及其他人类活动场所的环境消毒制剂；最优选作为貂类或禽类饲养场环境消毒制剂的用途。

本发明另一个方面提供了本发明所述绿脓杆菌噬菌体在制备预防貂类血性肺炎、鸡绿脓杆菌性脐炎、猪子宫内膜炎、奶牛乳房炎等的环境消毒制剂中的用途。

本发明再一个方面提供了一种环境消毒制剂，其中包含本发明所述的绿脓杆菌噬菌体，优选地，绿脓杆菌噬菌体浓度为108PFU/ml以上。