[发明专利]一种测定β-淀粉酶活力的方法

权利要求书

1.一种测定β-淀粉酶活力的方法，其特征在于，所述方法是联合采用对硝基苯酚麦芽戊糖苷法和DNS法测定待测样品中β-淀粉酶活力，所述方法中待测样品中β-淀粉酶的浓度为12-60μg/mL，所述方法具体是：

(1)采用纯化的β-淀粉酶稀释为不同浓度，分别采用对硝基苯酚麦芽戊糖苷法和DNS法测定反应后的吸光值；

(2)将对硝基苯酚麦芽戊糖苷法和DNS法测定的吸光值进行相关性分析，确定线性浓度范围；

(3)将纯化的β-淀粉酶稀释至步骤(2)的线性浓度范围内进行检测，建立线性拟合曲线回归方程y＝0.0079x+0.0089，x为DNS法测得的β-淀粉酶的酶活，y为对硝基苯酚麦芽戊糖苷法测得的OD₄₀₀值，所述OD₄₀₀值为400nm下β-淀粉酶的吸光度值，R²值为0.9886；

(4)将待测样品采用对硝基苯酚麦芽戊糖苷法进行测定，利用回归方程计算β-淀粉酶活力；

所述对硝基苯酚麦芽戊糖苷法具体为：取10～30μL酶液与专一性底物对硝基苯酚麦芽戊糖溶液一同置于50～60℃下保温2～4min后混合，50～60℃下反应10～15min，加入200～400μL终止缓冲液，取反应液测定400nm处的吸光值；

所述DNS法具体为：分别将1～2mL酶液和淀粉溶液置于50～60℃恒温水浴10～15min，再向酶液中加入1～2mL 1～2％淀粉溶液，50～60℃恒温水浴中10～15min，置于冰水浴2～4min终止反应，然后加入2～4mL DNS试剂，混匀，沸水浴中煮沸10～15min，取出冷却，用水定容至25mL，在540nm处测定吸光值。

2.权利要求1所述的方法在啤酒酿造、食品加工中的应用。