[发明专利]一种蛋白质Dhw1及其编码基因dhw1和应用有效
申请号: | 201810079409.5 | 申请日: | 2018-01-26 |
公开(公告)号: | CN107987134B | 公开(公告)日: | 2018-08-31 |
发明(设计)人: | 丁宏伟 | 申请(专利权)人: | 上海国礼生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C12N15/11;C12N15/70;A01N43/50;A01P21/00 |
代理公司: | 上海诺衣知识产权代理事务所(普通合伙) 31298 | 代理人: | 衣然 |
地址: | 201417 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白质 dhw1 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种蛋白质Dhw1,所述蛋白质Dhw1的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种编码权利要求1所述蛋白质Dhw1的基因dhw1,其特征在于,所述基因dhw1的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.根据权利要求1所述的蛋白质Dhw1在促进农作物生长中的应用。
4.根据权利要求3所述的蛋白质Dhw1在促进小麦和塔菜生长中的应用。
5.一种生产权利要求1所述的蛋白质Dhw1的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、人工合成权利要求2所述基因dhw1;
S2、得到转化有S1中基因dhw1的工程菌种;
S3、将S2中的工程菌种经培养后收集菌体发酵液;
S4、将S3中的菌体发酵液进行分离纯化得到蛋白质Dhw1。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述S1包括以下步骤:
S11:分别进行基因dhw1的单链oligo的设计与合成;
S12:利用PCR方法将S11中的单链oligo拼接成双链DNA,即得到基因dhw1。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述S2包括以下步骤:
S21:将基因dhw1克隆到pET28a载体得到dhw1-pET28a载体;
S22:将S21中得到的dhw1-pET28a载体转化至DH5a细胞,将转化后的DH5a细胞中的质粒提取后进行基因测序;
S23:将基因测序结果正确的质粒转化BL21感受态细胞,得到目的工程菌种。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述S3中的工程菌种在LB液体培养基中培养。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述S4中的分离纯化包括以下步骤:将菌种发酵液离心后,破壁,再用硫酸铵盐析,得到蛋白质Dhw1。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,采用超声波进行破壁处理。
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