[发明专利]一种提取分离冬凌草甲素的方法

说明书

本发明涉及一种提取分离冬凌草甲素的方法，将含冬凌草甲素的植物原料，采用含有有机溶剂的混合溶剂对冬凌草甲素进行浸取，固液分离后得到提取液；向提取液中加入少量的水，于低温环境中进行沉析，分离，沉淀即冬凌草甲素粗提取物；重复进行此步骤多次，直到没有沉淀析出为止；将分离出来的提取液进行溶剂回收，得到新鲜溶剂和浸膏，浸膏也是冬凌草甲素粗提取物；将适量的提取液与新鲜溶剂混合制成上述的混合溶剂，用于套用。本方法可节约溶剂，增大提取液的浓度，利于后续冬凌草甲素的析出。此外，分步添加水改变提取液极性，并配以低温放置，可得到不同含量的冬凌草甲素粗产品，低温沉析还使冬凌草甲素避免高温，利于冬凌草甲素的稳定。

技术领域

本发明属于生物化工技术领域，涉及一种从含冬凌草甲素植物中提取分离冬凌草甲素的方法，特别是涉及采用溶剂套用提取，添加水以改变溶剂极性，然后低温沉析的方法。

背景技术

冬凌草甲素是冬凌草中一种二萜类物质，其结构式如图1所示。

冬凌草和毛叶香茶菜，同属于唇形科香茶菜属植物，因为其独特的药用价值，在我国民间广泛使用。文献中报道它们有治疗若干癌症、咽喉肿痛，以及健胃，活血化瘀的功效。现代医学研究表明冬凌草和毛叶香茶菜之所以有药用价值主要是因为它们含有二萜类化合物冬凌草甲素。冬凌草甲素能够很好的抑制肿瘤细胞增殖，对乳腺癌、食道癌、胰腺癌等癌症的治疗效果较好。由于冬凌草甲素的这些抗肿瘤性质，近年来受到了国内外学者的广泛关注，而提取分离冬凌草甲素也成为研究的重要内容。

最常用的提取冬凌草甲素的溶剂是乙醇。冬凌草甲素在提取液中的稳定性比较差，主要是因为其活性中心α-亚甲基环戊烷比较活泼，受热时容易发生化学反应。传统的溶剂提取方法消耗溶剂量比较大，加热回收溶剂时冬凌草甲素损失比较大。若干新的分离手段，如超临界流体提取法也被实验用于提取冬凌草甲素，但是涉及到设备投资、操作成本等问题，并不能适用于工业化生产。

发明内容：

本发明的目的是提供一种低成本，高回收率的提取分离冬凌草甲素的方法，适合于大规模处理冬凌草和毛叶香茶菜，提取分离得到质量含量较高的冬凌草甲素粗提取物。

本发明的方法包括以下步骤：

(1)首次提取时，将含冬凌草甲素的植物原料，即冬凌草或者毛叶香茶菜，用有机溶剂，如乙醇浸取2－3小时，乙醇的含水量为0％～15％，固液分离后得到提取液。

(2)将得到的一部分提取液，加入1％～30％的水，然后放置于-25～0℃的低温环境中，一段时间后，将沉析出的沉淀与液体分离，沉淀即冬凌草甲素粗提取物。此步骤可以重复进行若干次即停止，也可以重复进行此步骤多次，直到没有沉淀析出为止。

(3)将步骤(2)中完成固液分离的提取液进行溶剂回收，分别得到新鲜溶剂和浸膏，浸膏也是冬凌草甲素粗提取物。

(4)将另外一部分提取液用于套用，即与新鲜溶剂合并混合制成混合溶剂。

当再次进行提取分离时，步骤(1)中的浸取采用混合溶剂，增大了冬凌草甲素在提取液中的浓度，可节约成本。

浸取时采用的是套用溶剂的方法制成混合溶剂。混合溶剂是指新鲜溶剂和使用过的溶剂，即以往浸取得到的提取液，按混合溶剂中提取液所占的重量比为20％－40％的比例制成混合溶剂。利用混合溶剂对冬凌草甲素进行提取。

在开始添加少量水的时候，可以将色素等主要杂质优先沉析出来，后面得到沉淀中冬凌草甲素含量比较高，而且色泽比较好。

本发明的技术方案的有益效果是：

采用溶剂套用的方式提取冬凌草甲素，节约了溶剂，同时增大了冬凌草甲素在提取液中的浓度，较高的浓度将有利于后续的析出步骤；

通过分步添加适量的水改变提取液极性，并配以低温放置，析出得到不同含量的冬凌草甲素粗产品，这些不同含量的冬凌草甲素粗产品可以被用于不同的终端产品；