[发明专利]一种毕赤酵母培养基及其用途

说明书

本发明提供了一种毕赤酵母培养基，包括以下浓度的组分：酵母粉20～30g/L、大豆蛋白胨30～40g/L、甘油10～30g/L、CaO2 50～100g/L、甲醇30～60g/L和PTM1溶液0.5～5ml/L，pH为6～8。本发明提供的巴斯德毕赤酵母培养基中，添加了CaO2作为溶氧载体，可以减少有机氧载体的使用成本，降低发酵的生产成本，同时也能够得到较高的重组蛋白表达量。本发明提供的培养基，在利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达重组蛋白的生产中具有广阔的应用前景。本发明可显著提高重组酵母菌的发酵溶氧水平和抗菌肽的表达水平，且生产过程简单易于控制、发酵周期短。

技术领域

本发明涉及一种毕赤酵母培养基及其用途。

背景技术

巴斯德毕赤酵母BMGY/BMMY培养基中，主要成分是酵母提取物(Yeast Extract)、蛋白胨(Peptone)和无氨基酵母氮源(Yeast Nitrogen Base)等。但这类培养基只适用于小规模培养，放大后，成本过高，而应用受限。目前大规模发酵培养基中，往往含有大量的有机氧载体，增加了生产成本，而且对于溶氧水平和稳定作用都不佳。CaO2作为常见的水溶液增氧剂，分解缓慢，而且对酵母菌体没有毒害作用，副产物也可以作为发酵盐离子，因此，对于添加CaO2不仅可以提高发酵的溶氧水平，而且也可以减少其他有机氧载体等添加剂的使用成本，有助于发酵的放大和工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种毕赤酵母培养基，以弥补现有技术的不足。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案：一种毕赤酵母培养基，包括以下浓度的组分：酵母粉20～30g/L、大豆蛋白胨30～40g/L、甘油10～30g/L、CaO250～100g/L、甲醇30～60g/L和PTM1溶液0.5～5ml/L，pH为6～8。

优选地，所述毕赤酵母培养基包括以下浓度的组分：酵母粉20～22g/L、大豆蛋白胨32～36g/L、甘油15～25g/L、CaO2 50～70g/L、甲醇35～40g/L和PTM1溶液3～4ml/L、pH为6～6.5。

优选地，所述毕赤酵母培养基包括以下浓度的组分：酵母粉20g/L、大豆蛋白胨35g/L、甘油25g/L、CaO2 50g/L、甲醇35g/L和PTM1溶液3ml/L，pH为6.5。

优选地，所述毕赤酵母培养基包括以下浓度的组分：酵母粉22g/L、大豆蛋白胨32g/L、甘油15g/L、CaO2 70g/L、甲醇40g/L和PTM1溶液4ml/L，pH为6。

本发明提供了一种生产抗菌肽pBD-1的方法，所述方法是以上述所述的毕赤酵母培养基作为发酵培养基对毕赤酵母进行发酵培养，得到所述抗菌肽pBD-1。

优选地，所述毕赤酵母是野生型菌株或是经过改造的含有外源基因的重组工程菌株。

本发明提供了上述所述的毕赤酵母培养基在生产抗菌肽pBD-1中的应用。

本发明的有益效果在于：

本发明提供的巴斯德毕赤酵母培养基中，添加了CaO2作为溶氧载体，可以减少有机氧载体的使用成本，降低发酵的生产成本，同时也能够得到较高的重组蛋白表达量。

本发明提供的培养基，在利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达重组蛋白的生产中具有广阔的应用前景。

本发明可显著提高重组酵母菌的发酵溶氧水平和抗菌肽的表达水平，且生产过程简单易于控制、发酵周期短。