[发明专利]鸡λ3干扰素、其突变体及其表达方法和应用

说明书

本发明公开了一种鸡λ3干扰素、其突变体及其表达方法和应用。本发明公开了鸡λ3干扰素突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。本发明将鸡λ3干扰素突变体第150位氨基酸由谷氨酸突变成赖氨酸得到SEQ ID NO.5所示的突变体，其抗病毒活性明显提高。本发明进一步将氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示突变体分别进行氨基酸单位点突变、双位点突变以及多位点突变，获得多个抗病毒活性显著提高的鸡λ3干扰素突变体。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达所获得的突变体，抗病毒活性提升显著。本发明提供的鸡λ3干扰素突变体在制备预防或治疗鸡病毒性疾病的药物或试剂中具有重要的应用前景。

技术领域

本发明涉及鸡λ3干扰素及其突变体，还涉及利用家蚕杆状病毒表达系统制备所述鸡λ3干扰素突变体的方法，本发明进一步涉及所述鸡λ3干扰素突变体在制备预防或治疗鸡病毒性疾病的药物或试剂中的应用，属于鸡λ3干扰素突变体的制备及应用领域。

背景技术

干扰素是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质，其活性的发挥又受细胞基因组的调节和控制，涉及RNA和蛋白质的合成。IFN蛋白家族根据其编码基因的序列、染色体定位和受体特异性分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素。Ⅰ型干扰素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-δ、IFN-ε、IFN-ζ、IFN-τ等，哺乳动物中主要是IFN-α和IFN-β。Ⅰ型干扰素具有较强的抗病毒活性，主要通过干扰病毒的复制抑制其增殖，还具有抗肿瘤和免疫调节的功能。Ⅱ型干扰素只有IFN-γ一个成员，又称为免疫干扰素，主要作用是激活巨噬细胞杀灭微生物。Ⅲ型干扰素是新发现的细胞因子，包括λ1(IL-29)、λ2(IL-28a)和λ3(IL-28b)。Ⅲ型干扰素与Ⅰ型干扰素关系密切，但有特殊的生理学功能，如刺激主要组织相容性复合体(major histocom-patibility complex，MHC)分子的活化和表达，调节先天免疫和获得性免疫等。由于干扰素具有广谱抗病毒、抗肿瘤的活性以及强大的免疫调节作用，现已成为病毒学、细胞学、分子生物学、临床医学、免疫学、肿瘤学等相关领域的研究热点之一。

鸡是常见的大规模养殖家畜之一，鸡肉人们日常食用肉类之一。鸡肉蛋白质含量较高，且易被人体吸收入利用，有增强体力，强壮身体的作用。此外，鸡肉还含有脂肪、钙、磷、铁、镁、钾、钠、维生素A、B1、B2、C、E和烟酸等成分；在医疗保健方面，鸡肉性平、温、味甘，入脾、胃经；可温中益气，补精添髓；用于治疗虚劳瘦弱、中虚食少、泄泻头晕心悸、月经不调、产后乳少、消渴、水肿、小便数频、耳聋耳鸣等，具有较高的药用价值。鸡羽毛可制出大肚的枕芯、被垫、背心、军用睡袋等，大羽毛还可制羽毛扇、羽毛球等。然而，一些病毒性疾病影响着鸡养殖业的生存和发展，也影响着人们的日常生活。因此，需要优质、廉价的鸡λ干扰素产品来应对这一问题。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种鸡λ3干扰素及鸡λ3干扰素突变体，所述鸡λ3干扰素突变体具有高抗病毒活性；

本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种利用家蚕杆状病毒表达系统制备所述鸡λ3干扰素或鸡λ3干扰素突变体的方法；

本发明所要解决的第三个技术问题是将所述鸡λ3干扰素或鸡λ3干扰素突变体应用于制备预防或治疗鸡病毒性疾病的药物或试剂。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

本发明首先公开了一种鸡λ3干扰素，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示，其编码基因的多核苷酸序列为(a)或(b)或(c)所示：

(a)SEQ ID No.2所示的多核苷酸序列；或

(b)与SEQ ID No.2的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列，该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；或