[发明专利]一种测定消毒后废水中消毒副产物联合生物毒性的方法

权利要求书

1.一种评价消毒后废水中消毒副产物生物毒性的方法，其特征在于，将驯养后的斑马鱼暴露在消毒前和消毒后的废水环境中，暴露12～15d时测定消毒前后废水中的总有机卤TOX，以TOX作为评价消毒副产物总量的指标，并通过对比斑马鱼体内抗氧化酶指标来评价消毒副产物的生物毒性；

具体包括如下步骤：

(1)驯养斑马鱼；

(2)设置两组空白组：空白1将斑马鱼暴露在曝气24h后的脱氯自来水中，空白2将斑马鱼暴露在加入次氯酸钠24h后再加入终止剂的脱氯自来水中；设置两组暴露组：暴露组1将斑马鱼暴露在未消毒的废水中；暴露组2将斑马鱼暴露在次氯酸钠消毒24h后加入终止剂硫代硫酸钠的废水中；

(3)于第15d测定暴露组1和暴露组2水体中TOX浓度，并测定斑马鱼体内的BCA蛋白含量，醛基MDA含量和过氧化氢酶CAT活性；

(4)总消毒副产物定量：消毒后废水中总DBPs浓度＝暴露组2和暴露组1的TOX差值，即(TOX_暴露2-TOX_暴露1)；

(5)判断消毒副产物的生物毒性：暴露组1的酶活指标相比空白1有显著差异，暴露组2酶活指标相比空白2有显著差异，且(CAT₂-CAT_空白2)相比(CAT₁-CAT_空白1)显著抑制，(MDA₂-MDA_空白2)相比(MDA₁-MDA_空白1)显著增加，则认为实验用水有亚急性生物毒性，反之无亚急性毒性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗氧化酶指标是指过氧化氢酶活性和醛基含量。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述驯养是将斑马鱼在脱氯自来水中驯养14d。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述消毒后废水是经过次氯酸钠消毒24h后加入终止剂硫代硫酸钠终止反应的污水。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：

(1)驯养斑马鱼：以平均体长1.93±0.2cm，平均体重0.25±0.05g的幼年斑马鱼为用于评估的生物，用曝气48h后的自来水驯养14d，水温为(25±1)℃，光暗比为12h:12h，溶解氧DO保持在7.0mg.L^-1以上，驯养期间斑马鱼死亡率小于5％方可用于下一步骤；驯养期间每天喂食一次，暴露在废水前24h停止喂食，暴露在废水的0～15天内不喂食；

(2)亚急性毒性测试：设置两组空白组，空白1实验用水为曝气24h后的脱氯自来水，空白2实验用水为加入次氯酸钠24h后再加入终止剂的脱氯自来水；设置两组暴露组，暴露组1实验用水为未消毒的废水；暴露组2为次氯酸钠消毒24h后加入终止剂硫代硫酸钠的废水；实验时间为15d；

(3)分别向各组中加入20条斑马鱼，于第15d测定暴露组1和暴露组2水体中TOX浓度，并测定斑马鱼体内的BCA蛋白含量，醛基含量和过氧化氢酶活性；消毒后废水中总DBPs浓度为暴露组2和暴露组1的TOX差值(TOX_暴露2-TOX_暴露1)；

(4)判断消毒副产物的生物毒性的判据为：暴露组1的酶活指标相比空白1有显著差异，暴露组2酶活指标相比空白2有显著差异，且(CAT₂-CAT_空白2)相比(CAT₁-CAT_空白1)显著抑制，(MDA₂-MDA_空白2)相比(MDA₁-MDA_空白1)显著增加，则认为实验用水有亚急性生物毒性，反之无亚急性毒性。

6.根据权利要求1或5任一所述的方法，其特征在于，所述废水采用次氯酸钠消毒，反应时间24h；反应温度25℃；NaClO投加量按照Cl：DOC＝5:1投加；24h后测定余氯，按照摩尔比120％投加硫代硫酸钠终止氯化反应。

7.权利要求1～6任一所述方法在环境领域水体评价方面的应用。