[发明专利]肾细胞癌中高水平表达的蛋白及其应用

说明书

一种肾细胞癌中高水平表达的蛋白及其应用，该Di‑Ras2蛋白氨基酸序列如Seq ID No.1所示。本发明Di‑Ras2蛋白在肾细胞癌肿瘤中的过表达能够促进肾细胞癌的增殖和浸润，因此检测Di‑Ras2的表达水平来进行早期诊断，通过抑制Di‑Ras2的表达而由此将Di‑Ras2作为药物靶标来辅助临床手术治疗提高肾细胞癌病人的治愈率，改善病人的生活质量。

技术领域

本发明涉及的是一种生物医疗领域的技术，具体是一种在肾细胞癌中高水平表达的蛋白Di-Ras2及其在肾细胞癌诊断标志物或治疗靶标的上的应用。

背景技术

肾细胞癌的临床表现多样，从典型的三联症，血尿、疼痛和可能触及的肾脏肿块，到较隐匿的肿瘤周围综合征，有时肿瘤体积很大，甚至出现肺、骨等转移征象，但依然无任何症状。虽然以手术为主的肾细胞癌后期治疗可以在很大程度上缓解病情，但对发生侵袭转移的肾细胞癌的疗效并不十分理想。早期肾细胞癌的手术疗效虽较好，但对某些病例也可采取非手术的方法治愈，因此除了定期体检外，还应积极探索其他治疗方法，或者以手术治疗为主的综合治疗方案，以提高疗效。到目前为止，很多生物标志物都不能很好的用来作为临床诊断标识，仅有助于判别肿瘤的预后及化疗疗效。所以还没有很好的分子诊断标识来辅助常规诊断检查，以及作为治疗靶标辅助外科手术治疗。

寻找肿瘤组织特异性高水平表达的蛋白标志物，并以之作为诊断治疗的靶点，是近来被认为是手术治疗的积极有效的辅助手段。肿瘤的发生发展与某些特意的信号通路激活、基因活化有关。某些膜蛋白的激活导致信号通路的活化，进一步导致某些基因的激活，维持肿瘤的发生发展。寻找这些差异性表达的(膜)蛋白，以此作为诊断肿瘤的标志物。如果是有具体功能的蛋白标志物，则可以结合开发特异性的封闭/激活抗体(药物)，定向的干扰/活化肿瘤组织中标志物的活性，结合临床手术治疗达到更有效的治疗肿瘤。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提出一种肾细胞癌中高水平表达的蛋白及其应用。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明通过基因芯片筛选得到Di-Ras2等在肾细胞癌病人组织中高表达的基因，其中Di-Ras2的表达变化最为显著，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示。

本发明涉及一种Di-Ras2蛋白的应用，将其用于制备肾细胞癌药物或治疗靶标。

技术效果

与现有技术相比，本发明Di-Ras2蛋白在肾细胞癌肿瘤中的过表达能够促进肾细胞癌的增殖和浸润，因此检测Di-Ras2的表达水平来进行早期诊断，通过抑制Di-Ras2的表达而由此将Di-Ras2作为药物靶标来辅助临床手术治疗提高肾细胞癌病人的治愈率，改善病人的生活质量。

附图说明

图1A为通过免疫组化检测组织样品中Di-Ras2的表达情况，比较成对的肿瘤组织与相邻的癌旁组织，Di-Ras2的表达水平；图1B为TCGA数据库中Di-Ras2表达强度分析，Di-Ras2的表达水平与临床分级的相关性，n＝623；图1C为Di-Ras2表达水平与病人预后生存情况的相关性分析；图1D和E为通过western blot，RT-PCR实验检测14对新鲜组织样本中，成对的样本(正常组织，肿瘤组织)中Di-Ras2蛋白水平的表达量；实验结果表明Di-Ras2在部分肾细胞癌中表达升高，并且与临床症状有紧密的相关性；

图2A为在786O和A498转染Di-Ras2过表达病毒建立的稳定细胞系中，通过RT-PC和Rwestern blot实验检测Di-Ras2的表达情况；图2B为两组细胞系通过细胞数目和MTS方法检测细胞的增值情况；图2C为两组细胞系通过细胞划痕方法检测细胞的迁移情况；图2D为两组细胞系通过metri-gel trans-well方法检测细胞的侵袭情况；图2E为两组细胞系通过核酸PI染色方法检测细胞的周期变化情况；其中*表示p0.05,**表示p0.01,***表示p0.001；