[发明专利]一种从橡胶树大树上获取黄化嫩叶的方法

说明书

本发明涉及一种从橡胶树大树上获取黄化嫩叶的方法，包括截枝、封石蜡、一次遮光处理、二次遮光处理、取样。采用本方法可从橡胶树大树上获取数量足够的、可满足重测序要求的黄化嫩叶，解决了橡胶树优良单株大树上黄化嫩叶无法获取的问题，避免了其他黄化嫩叶获取方法中面临的场地设施复杂、无法采集到大量枝条、枝条扦插工作量大、黄化叶片达不到实验要求即死亡等问题，且本方法对设施要求简单，操作步骤简单易行，且操作成本较低。

技术领域

本发明涉及一种橡胶树的黄化嫩叶获取方法，特别是一种从橡胶树大树上获取黄化嫩叶的方法，属于农林领域。

背景技术

橡胶树（Hevea brasiliensis Muell. Arg.）目前唯一大规模产业化的天然橡胶来源，由其胶乳制成的天然橡胶产品弹性好、耐磨损，且生产过程对环境友好，目前尚不能被合成橡胶所替代。因天然橡胶在工业、国防等领域有特殊需求，是一种重要的战略物资，在世界各国备受重视。由于天然橡胶只能种植在热带地区，适宜种植的土地有限，要想扩大产量，只能通过选育高产优良品种、提高单位面积产量的方式。

随着基因测序技术的发展，优良种质的基因组重测序已成为选育高产优良品种的关键，而黄化嫩叶是橡胶树基因组重测序最理想的样品材料，黄化嫩叶一般都是通过遮光生长获取。由于大多数橡胶树优良种质都是已割胶多年的大树，株高往往达20m以上，若对其整株进行遮光黄化处理，不仅需要非常大面积的遮光材料，操作起来并不现实，而且会影响树体的正常生长和产胶，甚至会导致观测和筛选多年的优良种质死亡；若对其小枝进行遮光黄化处理，因小枝位置极高，枝条柔弱，无法支撑人员上树操作，且遮光材料容易被风刮落。橡胶树大树黄化叶片的获取困难已经成为制约优良种质基因组重测序的主要因素之一。

现有技术公开一种应用枝条制备黄化苗的方法，若采用其公开的技术采集橡胶树优良单株枝条扦插进行遮光黄化处理，一是需要整套的苗床、拱棚等扦插场地和设施；二是橡胶树枝条扦插成活率较低，需要大量的枝条，对于部分稀缺橡胶树种质而言无法获取大量枝条；三是因橡胶树扦插枝条中胶乳流失，导致营养储备有限，黄化叶片还未达到实验采样要求即老化或死亡，无法获取数量足够的可满足重测序要求的橡胶树优良单株的黄化嫩叶。

采用目前已公开或报道的其他方法均无法获取可满足重测序要求的橡胶树优良单株的黄化嫩叶，目前也尚未见到橡胶树优良单株的黄化嫩叶的获取方法，尤其是可满足重测序要求的橡胶树优良单株大树上黄化嫩叶的获取方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明目的在于提供一种从橡胶树大树上获取满足重测序要求的黄化嫩叶的方法。

本发明所采用的具体技术方案如下：

一种从橡胶树大树上获取黄化嫩叶的方法，其特征在于：包括下列步骤：

步骤（1）、截枝：将橡胶树大树主枝上萌发出的与主枝的夹角小于30°的小枝从距离小枝基部60-80cm处截断，保持截口平整；

步骤（2）、封石蜡：截枝3-5 min后，用卫生纸擦除截面上流出的胶乳，用融化的石蜡均匀涂抹截面，石蜡层厚度为1.5-3mm；

步骤（3）、一次遮光处理：待截断后的小枝顶端附近抽出嫩芽且嫩芽长度为2-3cm时，取厚度为0.16-0.20 mm的黑色套袋，在套袋上戳2-3个直径为0.3-0.5mm的通气孔，将黑色套袋套入封石蜡后的小枝上，袋口扎紧；

步骤（4）、二次遮光处理：一次遮光处理后，继续套上第二个黑色套袋，两个黑色套袋的结构相同，套上第二个黑色套袋后，两个黑色套袋的通气孔的位置不重叠，扎紧袋口；

步骤（5）、取样：遮光处理15-40天后，拆除遮光用的黑色塑料袋，采集黄化嫩叶投入液氮或干冰中保存，即可获取可满足重测序要求的橡胶树优良单株大树上的黄化嫩叶。