[发明专利]重组猪白介素22在大肠杆菌中的高效表达及其应用

权利要求书

1.重组猪白介素22的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）重组猪白介素22基因的获得；所述重组猪白介素22的基因，其碱基序列如SEQ IDNO：1所示；

2）重组质粒pET-32a（+）-pIL-22的构建；将所述的基因插入到大肠杆菌pET-32a（+）表达载体中得到重组质粒pET-32a（+）-pIL-22；

3）重组大肠杆菌的表达；将所述的重组质粒pET-32a（+）-pIL-22导入大肠杆菌E. coliBL21 （DE3）中表达，通过菌落PCR进行验证获得阳性重组大肠杆菌；

4）重组猪白介素22的提取和纯化：将验证阳性的重组大肠杆菌诱导表达得到菌体，将菌体加入PBS重悬离心，重悬液进行超声破碎，破碎后的得到的菌液离心，收集上清和沉淀进行SDS-PAGE验证，发现目的蛋白在包涵体中大量存在，上清中几乎没有，将包涵体沉淀尿素变性后，再通过梯度透析复性，收集复性后的液体过His柱子，纯化得到猪白介素22。