[发明专利]青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子及其获得方法与应用有效
| 申请号： | 201810094836.0 | 申请日： | 2018-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN108070596B | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 唐克轩;马亚男;徐东北;付雪晴;石璞;陈明慧;黎凌;钟旖珺;谢利辉;沈乾;郝小龙;孙小芬 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/14 |
| 代理公司： | 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 优势表达 启动子 基因工程育种 核苷酸序列 基因启动子 代谢产物 植物腺毛 青蒿 非分泌型 目的基因 生长发育 遗传操作 植物组织 重要意义 分泌型 生产 调控 应用 | ||
1.一种青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子，其特征在于，AaTCP14基因启动子为SEQID NO：1所示的核苷酸序列，所述AaTCP14基因启动子的顺式作用元件如下表所述：
。
2.如权利要求1所述的青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子的获得方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、培养青蒿无菌苗；
步骤二、PCR克隆AaTCP14基因启动子基因序列；
其中，PCR引物对为：
PTCP14-F ACAAACAACACAGTTGGACAGGC；
PTCP14-R TTGCTGCTCAATGTCGTAGTG；
步骤三、分析AaTCP14基因启动子上面的顺式作用元件，确定AaTCP14基因启动子类型；
步骤四、将克隆到的AaTCP14基因启动子通过酶切连接连入pCAMBIA1391z载体中；
步骤五、将构建好的载体pCAMBIA1391z-AaTCP14转化根癌农杆菌；
步骤六、将带有pCAMBIA1391z-AaTCP14载体的根癌农杆菌稳定转化青蒿；
步骤七、PCR检测转基因植株；
步骤八、启动子所引导的GUS报告基因在植株中表达部位的确定。
3.如权利要求2所述的青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子的获得方法，其特征在于，所述步骤七中的PCR引物对为：
1391z-proTCP14-F CCAAGCTTGGCTGCAGGCATTGACCACTGAGATGACAGT；1391z-proTCP14-R
GAATTCCCGGGGATCCAGAGAGATAACTAGGCGTGATTG。
4.如权利要求1所述的青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子在利用青蒿腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种中的应用。
5.一种表达载体，其特征在于，含有如权利要求1所述的青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子。
6.一种试剂盒，其特征在于，含有如权利要求1所述的青蒿腺毛优势表达AaTCP14基因启动子。
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