[发明专利]厚朴多糖及其制备和用途

说明书

本发明涉及一种厚朴多糖的制备方法及其降血糖、降血脂活性。属于医药领域，国际专利号分类为C08B 38/60。一种厚朴多糖粗品和厚朴多糖精品，它是由植物厚朴皮粉碎后过筛，经热水提取，乙醇沉淀，4℃过夜，离心去上清，沉淀用乙醇洗涤三次，干燥后得厚朴水提物。厚朴水提物溶解于水，加入阴离子大孔树脂去色素和蛋白质。脱色液浓缩后，乙醇沉淀，离心去上清，沉淀用乙醇洗涤3次，干燥后得厚朴多糖粗品。厚朴多糖粗品经离子交换层析和凝胶过滤层析纯化后得厚朴多糖精品。它们具有降血脂、降血糖、抗炎活性和免疫调节作用。

技术领域

本发明涉及一种厚朴多糖的制备方法及其降糖、降脂、消炎和抗氧化活性，用于治疗与高血糖、高血脂、炎症相关的疾病或作为免疫调节剂，属于医药领域，国际专利分号分类为C08B37/60。

背景技术

中药厚朴为木兰科植物厚朴(Magnolia offcinalis Rend et Wils)的干皮、根皮或枝皮，性温、味苦辛、无毒，入脾、胃、大肠经，能温中下气，燥湿消痰。厚朴在我国有两千多年药用历史，用于治疗消化系统、呼吸系统等多个系统及器官的疾病，2015版《中国药典》记载的厚朴为主要原料药的中成药达20余种。我国很多方剂如厚朴三物汤、大承气汤、四七汤和桅子厚朴汤中都含有生药厚朴。

厚朴含有多种化学成分，包括酚类、生物碱类、挥发油类、黄酮类、多糖等成分，其中厚朴酚与和厚朴酚是主要活性成分，目前国内外对厚朴的药理研究主要其中在厚朴酚、和厚朴酚的抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤等作用。近年来，虽然中药大分子的研究最来最受到关注，但对厚朴多糖的研究仅限于提取方法的优化及体外抗氧化活性，对其结构和药理作用的研究还是空白。本发明通过解决厚朴多糖制备的技术性难题，获得均一厚朴多糖，并进一步研究了厚朴多糖的降脂、降糖、抗炎和免疫调节活性，证明厚朴多糖可以应用于高血脂、高血糖、炎症以及免疫相关疾病的治疗。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种从厚朴水提取物中获得厚朴多糖粗品的方法以及从厚朴多糖粗品中分离纯化得到厚朴多糖纯品的方法。

本发明所述的厚朴多糖为含D-葡萄吡喃环的多糖，具体由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖以摩尔比0.003：0.002：0.019：0.967：0.008组成，所述的厚朴多糖的分子量大于20000Da。

所述的获得厚朴多糖粗品的方法，将厚朴皮干燥品粉碎过筛后加入去离子水，加热，离心取上清，将上清液浓缩，加入乙醇沉淀，真空干燥后得到本发明所述的厚朴水提取物。将厚朴水提取物溶解于去离子水中，加入大孔树脂去色素和蛋白质，将脱色液过滤，加入乙醇沉淀，将沉淀真空干燥后得到本发明的厚朴多糖粗品(MOP)，其多糖含量占总固体重量的60％以上。

所述的获得厚朴多糖精品的方法，将厚朴多糖粗品(MOP)溶解于去离子水，用离子交换层析进行纯化，洗脱液为去离子水，用硫酸-蒽酮比色法跟踪检测，收集主峰，再采用凝胶过滤层析，洗脱液为去离子水，用硫酸-蒽酮比色法跟踪检测，收集主峰，真空干燥，即得到本发明所述的厚朴多糖精品(MOP-1)，其多糖含量占总固体的95％以上。

所述方法中，加热提取是在水浴中加热，水浴温度在60-95℃。

所述方法中，加热提取时间为1-6小时。

所述方法中，提取所用的液固比为5-30(mL/g)。

所述方法中，大孔树脂为阴离子交换树脂。

所述方法中，大孔树脂脱色时间为0.5-4小时。

所述方法中，离子交换树脂为二乙胺基乙基纤维素(DEAE-52)，或二乙胺基乙基萄聚糖凝胶(DEAE Sephadex A-25或DEAE Sephadex A-50)，或二乙胺基乙基琼脂糖凝胶(DEAESepharose)。

所述方法中，凝胶过滤层析所用填料为Sephcryl S-200。