[发明专利]抗VEGF抗体

说明书

本发明公开了特异性结合血管内皮生长因子(VEGF)的抗体，特别是重链抗体，更特别是单域抗体。还公开了所述抗体的制备方法和治疗用途。

本申请为申请号为201510005713.1的发明专利申请的分案申请，原申请日为2015年01月06日，公开日为2016年08月03日，发明名称为“抗VEGF抗体”。

技术领域

本发明涉及抗体及其应用，具体而言，本发明涉及特异性结合血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的抗体，特别是重链抗体，更特别是单域抗体；以及所述抗体的制备方法和治疗用途。

背景技术

血管生成是指从已有的毛细血管或毛细血管后静脉发展而形成新的血管，是一个涉及多种细胞的多种分子的复杂过程。血管生成是促血管形成因子和抑制因子协调作用的复杂过程，正常情况下二者处于平衡状态，一旦此平衡打破就会激活血管系统，使血管生成过度或抑制血管系统使血管退化。

已知许多疾病与血管生成失控和不希望有的血管生成有关。这些疾病包括但不限于肿瘤如所谓的实体瘤和液体(或血液)瘤(如白血病和淋巴瘤)，炎症如类风湿或风湿性炎症，尤其是关节炎(包括类风湿性关节炎)，或其它慢性炎症如慢性哮喘，动脉硬化或移植后动脉硬化、子宫内膜异位，眼新生血管疾病，如视网膜病(包括糖尿病视网膜病)、老年黄斑变性、牛皮癣、成血管细胞瘤、血管瘤、动脉硬化。其它与血管生成失控和不希望有的血管生成有关的疾病对本领域技术人员是显然的。

血管内皮生长因子，是对血管内皮细胞具有特异性的肝素结合生长因子，可在体内诱导血管新生。包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F和胎盘生长因子。

VEGF-A的主要作用为促进血管内皮细胞增殖、迁移和管腔的形成，同时也会增加血管渗漏、促进单核细胞趋化和B细胞生成。VEGF-A的生物学效应是依靠与其特异性受体结合而介导的，与其结合的主要是特异性受体血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1)和VEGFR-2。其中，VEGFR-2被认为是主要的VEGFR，其对血管内皮细胞的增生有重要影响。VEGFR-2通过细胞内激酶诱导VEGF绑定二聚体和需要自身磷酸化的受体，从而加强细胞的有丝分裂(Klettner A,Roider J.Treating age-related macular degeneration interaction ofVEGF-antagonists with their target.Mini Rev Med Chem,2009,9(9):1127-1135)。VEGF-A包括8个外显子和7个内含子，其转录剪接成多个亚型，主要为：VEGF121、VEGF145、VEGF206、VEGF165、VEGF189，这些亚型有不同的分子质量、溶解度和肝素结合能力，其中VEGF165是VEGF-A最主要的亚型(Ferrara N,Gerber HP,Le Couter J.The biology ofVEGF and its receptors.Nat Med,2003,9(6):669-676)。VEGF165是分泌型可溶性蛋白，能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖，加速血管内皮细胞损伤的修复，增加血管通透性，使血管内血栓形成及血栓性闭塞减少，并抑制内膜增生(黄晨星,沈祖光.血管内皮生长因子的研究及在组织修复中的应用J.中国修复重建外科杂志.2002,160:64–68)。