[发明专利]一种爱德万甜含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法

说明书

本发明涉及一种液体乳中爱德万甜含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，属于液体乳分析技术领域。该方法具体包括以下步骤：（1）样品预处理；（2）制备标准工作溶液；（3）配制基质加标溶液；（4）用超高效液相色谱一串联质谱联用仪进行检测分析计算。本发明大大的缩短了分析时间，提高了检测效率；准确度高且稳定；检出限低，线性范围宽，提高了分析灵敏度，建立了检测液体乳中爱德万甜的UPLC电喷雾串联三重四级杆质谱联用的分析方法，填补了国内检测爱德万甜质谱定性定量法的空白，对国内爱德万甜的探索研究具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种液体乳中爱德万甜含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，属于液体乳分析技术领域。

背景技术

爱德万甜（Advantame），分子式为N-{N-[3-(3-羟基-4-甲氧基苯基)丙基]-L-a-天冬氨酰}-L-苯丙氨酸-1-甲酯）（C24H30N2O7·H2O），分子量为476.52。Advantame水溶性好、耐热温度高，适于高温加工产品。

爱德万甜是一种非营养低热量高强度的新型甜味剂，具有非常微弱的知觉强度的苦味和酸味，可以添加于多种食品，且其甜味可达蔗糖20000倍，因此用量可以远低于现有市场上的蔗糖和其他高倍甜味剂。阿斯巴甜含有苯基丙氨酸，但由于Advantame其很小剂量就能达到增甜的效果，不会引发苯丙酮酸尿症或者PKU(氨基酸代谢性疾病常见的类型)。2014年5月21日，美国FDA发布最终法规，修订食品添加剂条例，批准高倍甜味剂Advantame作为非营养甜味剂和增味剂用于除肉类及家禽之外的食品中。同年5月15日，欧盟发布法规（EU） NO 497/2014，修订关于食品添加剂的法规（EC）NO1333/2008和（EU）NO231/2012附件中有关Advantame 作为甜味剂使用的规定。欧盟专家组通过对Advantame的稳定性、降解产物、毒性以及暴露风险进行评估，根据联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会评估结果，该物质的每日允许摄入量不超过5 mg/kg·bw。专家组认为按照该限量用于食品不会构成健康风险。

目前，在国外爱德万甜作为一种新型超级甜味剂被广泛应用于食品、饮料和药品，其安全性得到了国外食品安全机构的认可。国家卫计委在2017年10月31日发布《关于爱德万甜等6种食品添加剂新品种、环己基氨基磺酸钠（又名甜蜜素）等6种食品添加剂扩大用量和使用范围的公告（2017年第8号）》，该物质可作为甜味剂用于多种食品类别，改善食品口感。

目前，通过液相色谱检测爱德万甜时，分离时间为长，检出限高。现有技术中，尚未有能够快速高效的检测爱德万甜的方法。因此，研究一种能够高效快速的检测爱德万甜的方法成为了亟待需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种液体乳中爱德万甜含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法。该方法能用于大批量不同类型液体乳样品中爱德万甜的含量检测，将大大提高液体乳中爱德万甜的检测效率，降低乳品生产企业和检验机构的检测成本。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种液体乳中爱德万甜含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，包括以下步骤：

（1）称取样品，加水涡旋分散混匀，然后加入亚铁氰化钾溶液，乙酸锌溶液涡旋混匀，超声提取，定容后离心，过滤取清液待净化；用活化HLB SPE 柱，将提取清液上样， 5%甲醇淋洗，抽干，用甲醇洗脱两次，洗脱液45℃水浴氮吹至近干，用初始流动相复溶，经0.22μm有机微孔滤膜过滤，得预处理样品待上机；

（2）制备标准工作溶液：准确称取爱德万甜标准品 10.0 mg，甲醇溶解并定容到10 mL，配制成1 mg/mL 的储备液，置 4 ℃冰箱保存；