[发明专利]犬重组干扰素-λ1及其制备方法与应用在审
申请号: | 201810102572.9 | 申请日: | 2018-02-01 |
公开(公告)号: | CN108359004A | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 贾红;侯绍华;郭晓宇;鑫婷;朱鸿飞;姜一曈;陈美荣 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C07K14/555 | 分类号: | C07K14/555;C12N15/20;C12N15/81;C12N1/19;A61K38/21;A61P31/14;A61P31/20;C12R1/84 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;陈征 |
地址: | 100193 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组干扰素 制备 重组酵母 工程菌 毕赤酵母菌株 犬传染性肝炎 犬副流感病毒 应用 传染性疾病 核苷酸序列 密码子优化 犬细小病毒 表达系统 分泌表达 有效预防 比活性 高活性 抗病毒 犬瘟热 种犬 蛋白 基因 治疗 | ||
1.一种犬重组干扰素-λ1,其特征在于,其氨基酸序列为:
a)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列;或
b)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经替换、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基形成的具有同等功能的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述犬重组干扰素-λ1的基因,其特征在于,是如下a)或b):
a)其核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示;或
b)由SEQ ID No.1所示核苷酸序列经取代一个或几个核苷酸,得到编码犬重组干扰素-λ1的核苷酸序列。
3.含有权利要求2所述基因的重组表达载体。
4.含有权利要求2所述基因或权利要求3所述重组表达载体的宿主细胞。
5.如权利要求4所述的宿主细胞,其为毕赤酵母细胞。
6.权利要求2所述的基因或权利要求3所述重组表达载体或权利要求4所述的宿主细胞在制备广谱抗病毒药物中的应用。
7.权利要求2所述的基因或权利要求3所述重组表达载体或权利要求4所述的宿主细胞在制备广谱抗病毒制剂中的应用。
8.如权利要求6或7所述的应用,其特征在于,所述病毒为犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬传染性肝炎病毒、水泡性口炎病毒。
9.含有权利要求2所述基因或其编码蛋白的生物制剂或药物。
10.一种制备犬重组干扰素-λ1的方法,其特征在于,将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的犬干扰素-λ1基因定向克隆至质粒中构建重组质粒,重组质粒转化至毕赤酵母感受态细胞,制备重组菌,通过确定甲醇诱导条件、诱导浓度、诱导时间,蛋白收获时间等优化酵母的发酵、表达,采用超滤浓缩后Chelating SFF-Ni亲和层析的方法进行纯化,有效提高了产物的产量,获得高产量、高纯度的犬重组干扰素-λ1。
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